いつも参考にさせていただいております。
MDA MB231細胞を使って実験を始めたばかりの者です。
液体窒素からの凍結細胞を先輩から分けてもらい育てておりますが、
1:3で継代してセミコンフェルトで3日に一回のペースで継代しています。
6継代目でトランスフェクション のため細胞数を数えたところ、10cm
dishで2.0×106乗個、セミコンフェルトとはいえ、ライフテクノロジー社のコンフル細胞数の目安と比べるとかなり少ないかなと思いました。
また1日あたりの増殖率が1.45と倍加時間にして48時間と、一般的な教科書には
だいたい12-36時間とあり遅いのかもと思いました。
前にも別ロットで同じ細胞を育てたことがあり、同じ割合で2日に1回のペースで継代していたので、同じプロトコルで実験を進めて良いか危惧しています。
細胞を頂いたのが質問しにくい先輩のため、同じ細胞を使用された方がいれば、増殖スピードなど教えてください。 |
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