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プラスミドにおけるGFP遺伝子の変異 トピック削除
No.6513-TOPIC - 2017/12/08 (金) 12:03:26 - MINT
基本的なことで申し訳ないのですが教えていただきたいです。
プラスミドに組み込まれているGFP遺伝子を変異させて、緑色ではない蛍光を示すタンパク質を作ると仮定します。
1.特定のアミノ酸を同時にランダム変異させる場合
2.GFP遺伝子全体にランダム遺伝子を導入する場合
以上2点の実験方法がわかる方は教えていただきたいです。
よろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.6513-7 - 2017/12/08 (金) 18:31:09 - AP
FACS

(無題) 削除/引用
No.6513-6 - 2017/12/08 (金) 16:53:03 - qq
大腸菌の中で発現するとして、
誰かの言った変異導入を試みて大腸菌を薄く撒き、そのコロニーを種々の波長のLEDで照射して写真を取り、色の違うコロニーを丹念に拾う。
いずれにしても、選択方法が必要だね。

(無題) 削除/引用
No.6513-5 - 2017/12/08 (金) 15:58:48 - mon
2.突然変異誘発大腸菌株(XL1-RED等)の使用

(無題) 削除/引用
No.6513-4 - 2017/12/08 (金) 15:55:19 - mon
2.変異原処理

(無題) 削除/引用
No.6513-3 - 2017/12/08 (金) 14:02:53 - AP
2. error-prone PCR (epPCR)

1. 特定のアミノ酸というのは特定のポジションのアミノ酸ということでしょうか、ポジションに関係なく一種類のアミノ酸ということでしょうか?
前者であれば、アミノ酸は20種類しかないから「ランダム」変異誘導なんかしなくても全部狙って作ればいいわけですし。

(無題) 削除/引用
No.6513-2 - 2017/12/08 (金) 12:27:45 - AA
学生実験のレポートでしょうか?

mutagenesis (ミュータジェネシス)などの単語で検索するといろいろ出てくるのではないかと思います。

プラスミドにおけるGFP遺伝子の変異 削除/引用
No.6513-1 - 2017/12/08 (金) 12:03:26 - MINT
基本的なことで申し訳ないのですが教えていただきたいです。
プラスミドに組み込まれているGFP遺伝子を変異させて、緑色ではない蛍光を示すタンパク質を作ると仮定します。
1.特定のアミノ酸を同時にランダム変異させる場合
2.GFP遺伝子全体にランダム遺伝子を導入する場合
以上2点の実験方法がわかる方は教えていただきたいです。
よろしくお願いします。

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