Bio Technical フォーラム

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レンチウイルスベクター トピック削除
No.6505-TOPIC - 2017/12/05 (火) 13:02:44 - レンチ
レンチウイルスを用いて遺伝子導入を検討している者です。
できるだけ安価に効率よくトランスフェクションができないかと思っているので、キットを購入して数十回で使い終わってしまうものではなく、細胞やトランスフェクション試薬も含めて、gagやenv、発現ベクターをそれぞれ購入したいと考えているのですが、レンチウイルスを普段扱っていらっしゃる皆さんはどのようにされているのでしょうか?
よろしくお願い致します。
 
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No.6505-5 - 2017/12/06 (水) 09:38:23 - X
VSVG-envとgag-polはAddgeneから購入、transfectionはPEIでやってます。発現ベクターは、手持ちのバックボーンを用いる場合がほとんどですが、特殊なものはAddgeneから購入した事もあります。昔は、Tronoのラボとかから供与してもらったりしましたが、今はAddgeneを介して購入する形になりますね。

(無題) 削除/引用
No.6505-4 - 2017/12/06 (水) 01:11:07 - おお
どのキットですか?

(無題) 削除/引用
No.6505-3 - 2017/12/05 (火) 22:04:37 - mon
パッケージング用plasmid溶液は、希釈して大腸菌に導入しシングルコロニーを複数調べて(メーカーが意地悪してなければAmp耐性、もしかしたらKn耐性)、それぞれのplasmidをレスキューすれば、再構成出来ますよ。
混合量比は、元のplasmid溶液を泳動して各バンドの濃さをみれば判ると思います。

(無題) 削除/引用
No.6505-2 - 2017/12/05 (火) 20:29:26 - mon
理研やAddgeneから購入出来ます。

レンチウイルスベクター 削除/引用
No.6505-1 - 2017/12/05 (火) 13:02:44 - レンチ
レンチウイルスを用いて遺伝子導入を検討している者です。
できるだけ安価に効率よくトランスフェクションができないかと思っているので、キットを購入して数十回で使い終わってしまうものではなく、細胞やトランスフェクション試薬も含めて、gagやenv、発現ベクターをそれぞれ購入したいと考えているのですが、レンチウイルスを普段扱っていらっしゃる皆さんはどのようにされているのでしょうか?
よろしくお願い致します。

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