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ELISAの遺伝子間比較について
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No.6502-TOPIC - 2017/12/04 (月) 13:13:17 - neka
いつも楽しく拝見しております。
ELISAによるタンパク質発現定量について質問があります。
ある組織における遺伝子A、B、Cの発現をタンパク質レベルで比較したいと考えています。
仮にELISAでA,B,Cを定量した場合、定量値を3遺伝子間で単純に比較することは可能でしょうか。
ちなみに、ELISAでは、リコンビナントタンパクによって検量線を引く予定です。
もしELISAによる遺伝子間発現の比較の前例や、ほかの方法があるとすれば教えていただけますと幸いです。
どうぞよろしくお願いいたします。
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No.6502-3 - 2017/12/04 (月) 13:34:45 - AP
抗原を定量的に捕捉固相化できる、sandwich ELISAなどの方法であれば可能でしょう。
抽出タンパク質をダイレクトに固相にくっつけるのはキャパシディもダイナミックレンジも小さいし、標定外のタンパク質が大量に混じっている状態では難しいでしょう。それだったら、メンブレンベースのドット/スロット ブロットのほうが現実的。
>ちなみに、ELISAでは、リコンビナントタンパクによって検量線を引く予定です。
単一に精製された標的タンパク質の固相化と大量の夾雑タンパク質(キャリアータンパク質)中の標的タンパク質の固相化ではパラダイムが異なる可能性が高いことに注意。
(無題)
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No.6502-2 - 2017/12/04 (月) 13:25:47 - おお
比較はできるけど、比較して何を言うのかでしょう。
ELISAの遺伝子間比較について
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No.6502-1 - 2017/12/04 (月) 13:13:17 - neka
いつも楽しく拝見しております。
ELISAによるタンパク質発現定量について質問があります。
ある組織における遺伝子A、B、Cの発現をタンパク質レベルで比較したいと考えています。
仮にELISAでA,B,Cを定量した場合、定量値を3遺伝子間で単純に比較することは可能でしょうか。
ちなみに、ELISAでは、リコンビナントタンパクによって検量線を引く予定です。
もしELISAによる遺伝子間発現の比較の前例や、ほかの方法があるとすれば教えていただけますと幸いです。
どうぞよろしくお願いいたします。
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