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(無題) 削除/引用 No.6489-3 - 2017/11/28 (火) 22:14:32 - Kent monさん、 詳しいご説明、ありがとうございます。 大変助かりました！ >[Re:2] monさんは書きました : > 急速凍結を行う理由は、氷の結晶が出来て構造体が壊れることを避けるためです。 > 酵素の解凍：中間的な凍結/融解界面で氷の結晶が出来ることを避けるため急速解凍がよいが、さほど問題にならないことが多い。ただし過温に注意。不純物(分解酵素等）が多い場合は氷上融解の方がよいときも多い。 > 細胞の解凍：急速がよい。凍結保護剤の影響を最小時間にするためでもある。25-30℃のwater bathでの急速解凍＞培地を添加して遠心＞凍結液除去がbetter。 > コンピテントセル：0℃(4℃？）以上になると形質転換効率が落ちるので、氷上で溶解。

(無題) 削除/引用 No.6489-2 - 2017/11/28 (火) 11:03:19 - mon 急速凍結を行う理由は、氷の結晶が出来て構造体が壊れることを避けるためです。 酵素の解凍：中間的な凍結/融解界面で氷の結晶が出来ることを避けるため急速解凍がよいが、さほど問題にならないことが多い。ただし過温に注意。不純物(分解酵素等）が多い場合は氷上融解の方がよいときも多い。 細胞の解凍：急速がよい。凍結保護剤の影響を最小時間にするためでもある。25-30℃のwater bathでの急速解凍＞培地を添加して遠心＞凍結液除去がbetter。 コンピテントセル：0℃(4℃？）以上になると形質転換効率が落ちるので、氷上で溶解。

酵素の冷凍方法 削除/引用 No.6489-1 - 2017/11/28 (火) 08:03:57 - Kent 今混乱しているので教えてほしいのですが、グリセロールの入っていない酵素を冷凍するときはドライアイスとエタノールで比較的急速に冷凍して-80に入れています。 これを解凍するときは酵素活性の点からするとゆっくりと溶解するほうがいいのでしょうか？それとも急速に解凍するほうがいいでしょうか？ いつもは手のひらで溶かしているので、急速に解凍しています。また細胞も37度のバスで急速解凍していますが、コンピテントセルは氷上でゆっくりと解凍しているのでどれかが間違っているような気がしています。 詳しい方教えてください。

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