全5件 ( 1 〜 5 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

(無題) 削除/引用 No.6455-5 - 2017/11/18 (土) 03:43:44 - おお 増殖のアッセイ方法によってはアッセイしたWellから蛋白を取ることも可能かもしれません。 蛋白を濃縮したいのであればアセトンやTCAを使えばできないことはないかと。

(無題) 削除/引用 No.6455-4 - 2017/11/17 (金) 14:18:16 - とし おおさん 細胞によっては96穴 12wellぐらい使わないとうまく見れない場合があり、そうするとsiRNAは8種類使うため96穴をフルに使ってしまうんですよね・・・（増殖アッセイに合わせるために6穴などではなくタンパクも96穴で見ています）。 ただlysis bufferをもっと減らして濃く抽出すれば今よりは細胞量節約できるので、その辺りは考える余地があるのかなと思いました。ご意見ありがとうございます。 独り言さん ご意見ありがとうございます。励みになります。

(無題) 削除/引用 No.6455-3 - 2017/11/16 (木) 10:18:48 - 独り言 ラボでsiRNAの系が安定してワークしていて、使用しているオリゴでも何度かWBして再現性が取れているのであれば、毎回WBでチェックしなくてもいいと思います。

(無題) 削除/引用 No.6455-2 - 2017/11/16 (木) 00:32:41 - おお ９６穴 １Wellあれば一回ぐらいはWBできますけど。

ノックダウン効率は毎回確認？ 削除/引用 No.6455-1 - 2017/11/15 (水) 15:35:22 - とし siRNAで一過性にノックダウンを行い、増殖に対する影響を見ようとしています。 既にノックダウン効率の確認は行っているのですが、本試験として計6細胞、n=3で行う予定のため、毎回増殖アッセイだけでなくノックダウン効率を見るためにタンパクを取るとなると、トランスフェクション試薬もsiRNAもそれだけ余分に使うことになり、コストが跳ね上がってしまいます。 みなさまはどうなさっていますか？やはり毎回確認されてますでしょうか・・・。

全5件 ( 1 〜 5 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

パスワードを入力してチェックした記事を

チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する 名前  メール  　アドレス非公開    タイトル  本文       設定  クッキーを保存（次回の入力の手間を省けます） 上に上げない（トピックの一覧で一番上に移動させません） 解決（問題が解決した際にチェックしてください） 暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。 送信

---

〔使い方〕 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。

---