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20kDaのタンパクの転写
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No.6363-TOPIC - 2017/10/04 (水) 10:16:12 -
し
20kDaのタンパクを転写する際の
最適な電圧と転写時間を教えていただけませんか?
タンパク量としてはさほど多くないためより多くの目的タンパクを転写したいです。
転写方法はセミドライ式で、pvdfを用いております。
素人質問ではありますが、どなたか宜しくお願い致します。
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(無題)
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No.6363-3 - 2017/10/05 (木) 09:56:37 - mon
最適な電圧と転写時間は、目的タンパクの性質、泳動buffer(泳動後ゲル内buffer)組成、ゲルの厚み、転写bufferの組成によって変わるので一概には言えませんが、おおさんの仰るとおり標準で遜色ないと思います。
以下の最後の方にTipが載っているように、転写bufferは20%メタノール添加した3液法、PVDF膜も0.25um poreサイズを使用すると良い結果が得られやすいと思います。
http://www.sigmaaldrich.com/content/dam/sigma-aldrich/docs/SAJ/Brochure/1/j_recipeabwb.pdf?utm_source=researchfocus170925
ATTOのサイトにもTipが載っていたと思います。
(無題)
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No.6363-2 - 2017/10/04 (水) 16:10:37 - おお
標準の方法でいいと思う
20kDaのタンパクの転写
削除/引用
No.6363-1 - 2017/10/04 (水) 10:16:12 -
し
20kDaのタンパクを転写する際の
最適な電圧と転写時間を教えていただけませんか?
タンパク量としてはさほど多くないためより多くの目的タンパクを転写したいです。
転写方法はセミドライ式で、pvdfを用いております。
素人質問ではありますが、どなたか宜しくお願い致します。
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