BioTechnicalフォーラム [HeLaにPEI]

HeLaにPEI

No.6348-TOPIC - 2017/09/29 (金) 13:32:20 - PEI

表題の通りなのですが、HeLaってPEIと相性悪かったりするんでしょうか？
すべてを全く同じ比率でトランスフェクションした結果、HEK293は全く問題なかったのですが、HeLaの方は80％ぐらいが死んでいたので、PEIはHeLaに対して毒性を示すのかなぁ、と気になりました。

最適な条件さえ検討すれば、HeLaでも使えなくもないのでしょうか…？
　

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No.6348-6 - 2017/10/01 (日) 15:09:29 - PEI

どうもありがとうございます。結局は、当然の話ではありますが条件検討が必要ということですね。
複合体形成の培養時間・試薬の量と比・培地に添加後の培養時間、などがクリティカルな因子でしょうか。色々なパターンで最適条件を見つけようと思います。

返信いただけた皆様誠にありがとうございました。

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No.6348-5 - 2017/09/30 (土) 18:11:41 - toto

どの細胞でもそうですが、HeLaは特にどこからもらったかのソース間の差が大きく、うちに3種類のソースからHeLaがありますが、いずれもトランスフェクション効率も至適条件も結構違います。PEIは至適レンジが狭いので、高い効率と低毒性が必要なら、使われてる細胞で、DNAとPEIの量と細胞を蒔いてからtfするまでの時間を振って求めましょう。量によっては毒性も出ます。293とはレンジはかなり違います。

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No.6348-4 - 2017/09/30 (土) 16:16:18 - 独り言

日常的に２９３にPEI使ってますが、HeLaでもたまにやっている限りでは、特に問題ないです。導入効率も毒性もlipofectamineより少し落ちるぐらいで、問題になるようなことはありません。

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No.6348-3 - 2017/09/30 (土) 14:58:19 - PEI

情報ありがとうございます。あることはあるみたいですね。毒性に関しては、PEIの量を減らしてみるなり、培養時間を短縮するなりしてみる価値はありそうだという感じですね。

もし日常的にHeLaにPEIを使っている方がいらっしゃいましたら、条件をご教示いただけると大変幸いです。

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No.6348-2 - 2017/09/30 (土) 13:06:26 - おお

HeLaに導入したという文献やラボプロトコールなど見かけるけどね。HeLaはいくらか導入効率は低いと書いているのも見かける。