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(無題) 削除/引用 No.6313-3 - 2017/09/15 (金) 03:29:01 - おお APさんが書いている以上のことはかけませんが一度Molecular cloningなどの解説がしっかり載っている成書をお読みください。 昔はプラスミドのバックボーンがpUC由来だとかコンストラクトの由来を遡ることもそんなに困難ではなかったのですが、今はどうなんでしょうね。。。 また配列からOriを割り出すことも一応可能かと思います。

(無題) 削除/引用 No.6313-2 - 2017/09/14 (木) 21:28:00 - AP ori/repliconが何かが分かればわかります。 通常使われるプラスミドはpMB1 oriのものがほとんどです。 そのうち温度感受性突然変異をもっているのが>500 copy/cellのハイコピーです。pUC, pBlueScript, pGEMなど主だったプラスミドはこれ。他のベクターでもマップにはpUC oriと書かれていることがあればこれです。ただし、pBR322 oriと書かれている場合もあって、後述のローコピーのoriなのか、変異型のハイコピーのことなのか間ぎらわしいこともあり。 pBR322に代表される野生型のpMB1 oriのプラスミドは30 copy/cell程度のローコピーです。他のベクターではマップにpBR322 oriと書かれていることが多いと思います。ただし上記のように変異型oriのつもりでそう書かれていることもあり。融合タンパク質発現用のベクターは、ほぼすべてこのローコピーです。

ハイコピープラスミドとローコピープラスミドの区別 削除/引用 No.6313-1 - 2017/09/14 (木) 21:02:30 - プラスミド プラスミドをmidi-prepで増やそうとしているのですが、ハイコピープラスミドとローコピープラスミドで、若干プロトコルが違うようです。 今、自分が扱っているプラスミドが、ハイコピーなのかローコピーなのかは、どのようにすれば分かるのでしょうか？ よろしくお願いします。

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