Bio Technical フォーラム

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検体の海外への送付(酵素活性測定) トピック削除
No.629-TOPIC - 2012/06/13 (水) 15:35:28 - あおぞら
いつも参考にさせていただいております。

患者末梢血(白血球)末梢白血球からの少量ミトコンドリア分離法によるミトコンドリア酵素活性の測定を、共同研究者(米国)にお願いすることになりました。
そこで、以下の問題があり、もしアドバイスがありましたら、聞かせていただけると大変ありがたいです。

1)白血球まで分離し凍結したサンプルを、送付して、ミトコンドリア抽出後解析は可能でしょうか?それともミトコンドリア分画までこちらで抽出作業を行った後、フリーズして送付したほうがベターでしょうか。
2)採血したのち、次の作業まで、数時間のタイムラグがどうしても発生します。しばらくの間の全血での保存は、大丈夫でしょうか?また何度で保存がベターでしょうか。

よろしくお願いいたします。
 
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(無題) 削除/引用
No.629-2 - 2012/06/13 (水) 17:08:38 - ~
送付先の方法に従うのがベストでしょう。
測定依頼を受けるくらいですから、どのステップで止めることができるかや、サンプリング法についての知見があるでしょう。


凍結処理で活性の落ちる酵素はありますね。
目的酵素がどうなのかは、目的タンパク質次第でしょう。


採血後、4℃で保存すると血中濃度が増加する成分、室温で保存すると増加する成分、室温で保存すると減少する成分等がありますね。
(血中濃度の話なので、細胞内でも同じ方向に変化するか、逆の変化になるかは成分次第でしょうけれども)
その酵素の活性にそれらがどう影響するかは調べているのでしょうか?

目的タンパク質の性質によっては実験が成立するかもしれませんので、一般論ではなくあおぞらさんの目的のたんぱく質について調べてみてはいかがでしょうか。

検体の海外への送付(酵素活性測定) 削除/引用
No.629-1 - 2012/06/13 (水) 15:35:28 - あおぞら
いつも参考にさせていただいております。

患者末梢血(白血球)末梢白血球からの少量ミトコンドリア分離法によるミトコンドリア酵素活性の測定を、共同研究者(米国)にお願いすることになりました。
そこで、以下の問題があり、もしアドバイスがありましたら、聞かせていただけると大変ありがたいです。

1)白血球まで分離し凍結したサンプルを、送付して、ミトコンドリア抽出後解析は可能でしょうか?それともミトコンドリア分画までこちらで抽出作業を行った後、フリーズして送付したほうがベターでしょうか。
2)採血したのち、次の作業まで、数時間のタイムラグがどうしても発生します。しばらくの間の全血での保存は、大丈夫でしょうか?また何度で保存がベターでしょうか。

よろしくお願いいたします。

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