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ショ糖勾配遠心分離 トピック削除
No.6171-TOPIC - 2017/08/01 (火) 09:47:49 - NBC
はじめまして、ショ糖勾配遠心分離において質問があり、アドバイスが欲しく掲示板に投稿させていただきました。

私はあるサンプルをショ糖勾配遠心分離によって4つのBandに分画し、シリンジで回収していますが、目測で回収するしかない為、正確に分画物を回収することができません。

私は4つの分画物が占める元のサンプルの割合を知りたいのですが、何か遠心分離後の分画物の体積を正確に測定する方法はないでしょうか?
もしくは分画物を正確に回収できる方法はないでしょうか?

どうかよろしくお願い致します。
 
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No.6171-6 - 2017/08/02 (水) 17:26:04 - NBC
なるほど、学内にあったと思いますので借りてみようと思います。

ありがとうございます。

(無題) 削除/引用
No.6171-5 - 2017/08/02 (水) 16:24:43 - mon
フラコレ=フラクションコレクターです。
単純なものは滴数をカウントして、あるいは定秒数で、収集チューブを自動で移動します。
カラム装置と連動するものは、さらに吸光度がピーク(立ち上がりから終わりまで)の分画のみを収集出来ます。

(無題) 削除/引用
No.6171-4 - 2017/08/02 (水) 14:16:25 - NBC
ご返信ありがとうございます。
皆様の貴重な意見ありがとうございます。早速試してみます。

分離したいサンプルはショウガ科のウコン由来のものを使用しており、分画物が黄色のバンド帯を作るので目測でわかります。

ちなみに勉強不足で申し訳ないのですが、『フラコレ』とは何のことでしょうか?調べても分からなかったので教えていただきたいです。

(無題) 削除/引用
No.6171-3 - 2017/08/01 (火) 11:00:57 - mon
チューブ底に針で穴をあけ(密閉チューブなら上部にも空気穴も)定めた滴数でエッペン等に手動でフラコレ、という手もあります(一番底のバンドの直下に斜めに注射針を差し入れて収集する方法もあります)。
エッペンに500uLとか1mLの目盛りが記載されているものを使いそのラインまで収集すれば、おおよその分画体積は判ります(ラックにエッペンを並べておきラックを手動で動かしていくと便利)。
また、収集した分画液は1mL以下ならピペットマンの目盛りを合わせていくと体積を測れますよ。

(無題) 削除/引用
No.6171-2 - 2017/08/01 (火) 10:51:15 - AP
ペリスタポンプで管底から吸い出しながらフラコレ
4画分と言わず、もっと細かく取って、あとでプールすればいいんじゃない?

目測でとありますが、分画物が目に見えるということでしょうか?

ショ糖勾配遠心分離 削除/引用
No.6171-1 - 2017/08/01 (火) 09:47:49 - NBC
はじめまして、ショ糖勾配遠心分離において質問があり、アドバイスが欲しく掲示板に投稿させていただきました。

私はあるサンプルをショ糖勾配遠心分離によって4つのBandに分画し、シリンジで回収していますが、目測で回収するしかない為、正確に分画物を回収することができません。

私は4つの分画物が占める元のサンプルの割合を知りたいのですが、何か遠心分離後の分画物の体積を正確に測定する方法はないでしょうか?
もしくは分画物を正確に回収できる方法はないでしょうか?

どうかよろしくお願い致します。

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