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シスチン,尿素の調製と透析時間 トピック削除
No.6054-TOPIC - 2017/06/15 (木) 23:15:20 - 溶けない
タンパク質のリフォールディング実験をしているものです。


実験書を拝見しますと,
酸化還元剤と尿素は用事調製せよと指導されています。
しかしながら,具体的にどこまでのスパンで一時保存がゆるされているのでしょうか?なかなか,返答が難しいと思いますがご意見お願いします。


また,シスチンを溶かす(0.5 mM程度)際に,ホットスターラーを使っていますが,
なかなかとけてくれません。沸騰しないようにしているのですが,温度が低すぎるでしょうか?pHは8程度に調整はしています。

透析時間なのですが,
長すぎるとうまくいかない場合はあるでしょうか?


質問がおおくすみません
リフォールディングリフォールディングがうまくいかず困っています。
 
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ありがとうございます 削除/引用
No.6054-5 - 2017/06/19 (月) 14:31:08 - 溶けない
おおさん

ありがとうございます
返信遅くなり失礼しました

>0.5 mMは厳しいのでは
調べがあまかったです。

>何度ですか?
40度ぐらいです。

(無題) 削除/引用
No.6054-4 - 2017/06/16 (金) 04:42:04 - おお
https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/sigma-aldrich/docs/Sigma/Product_Information_Sheet/c8755pis.pdf


Preparation Instructions
This product is soluble in 1 M HCl (50 mg/ml), with
heat as needed, yielding a clear, colorless solution.
The solubility of cystine in water is 0.112 mg/ml at
25 °C; cystine is more soluble in aqueous solutions
with pH < 2 or pH > 8.

と書いているので0.5 mMは厳しいのでは?

pHは8ぐらいと書いてますけど、溶解したじょうたいで8になってますか?8より高いと溶けやすいようなのでもう少し上げるように工夫するか、HClで溶かすか。。。

(無題) 削除/引用
No.6054-2 - 2017/06/16 (金) 04:29:12 - おお
>沸騰しないようにしているのですが,温度が低すぎるでしょうか?
何度ですか?

シスチン,尿素の調製と透析時間 削除/引用
No.6054-1 - 2017/06/15 (木) 23:15:20 - 溶けない
タンパク質のリフォールディング実験をしているものです。


実験書を拝見しますと,
酸化還元剤と尿素は用事調製せよと指導されています。
しかしながら,具体的にどこまでのスパンで一時保存がゆるされているのでしょうか?なかなか,返答が難しいと思いますがご意見お願いします。


また,シスチンを溶かす(0.5 mM程度)際に,ホットスターラーを使っていますが,
なかなかとけてくれません。沸騰しないようにしているのですが,温度が低すぎるでしょうか?pHは8程度に調整はしています。

透析時間なのですが,
長すぎるとうまくいかない場合はあるでしょうか?


質問がおおくすみません
リフォールディングリフォールディングがうまくいかず困っています。

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