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(無題) 削除/引用 No.6042-8 - 2017/06/15 (木) 11:08:46 - サンショウウオ PEGをタンパク質にくっつけての活性制御？でもしているのかな？ 　 　PEGがくっつく場所が活性サイトの遠くだと、たいして活性は変化しないです。（PEGサイズにもよりますが。） 　とりあえず、蛋白の立体構造とPEGを並べて見てみてはとすすめてみる。

(無題) 削除/引用 No.6042-7 - 2017/06/12 (月) 04:26:11 - おお 操作がうまくいかないというのは何をもってそう言っているのか？ 思ったように行かないのはPEG-malemideがつかないのか、ついたけど結果が思うように行ってないのか、ご自身の中で分析できているのでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.6042-6 - 2017/06/11 (日) 14:55:59 - mon 「タンパク質のレドックス制御の確認」と反応の意味づけがわからんのは、私が頭が古いのかな？反応からは、制御ではなく、目的（?)タンパクをPEG化したいだけなような。。。 アセトン沈殿に問題が無いとして、反応液pHを7以下に下げる方が良いような。 あと、NEM、HENSって何？

(無題) 削除/引用 No.6042-5 - 2017/06/11 (日) 14:35:18 - みーる monさん タンパク質に fin.10mM DTT、GSSG ↓ アセトン沈殿 ↓ HENS　ph8 fin.20mM NEM ↓ アセトン沈殿 ↓ HENS　ph8 fin.10mM TCEP fin.1mM PEG-malemide ↓ アセトン沈殿 しているんですが思うように結果が出ないです

(無題) 削除/引用 No.6042-4 - 2017/06/11 (日) 14:32:44 - みーる monさん タンパク質のレドックス制御の確認がしたいです

(無題) 削除/引用 No.6042-3 - 2017/06/11 (日) 14:21:48 - mon http://www.nof.co.jp/business/dds/product01.html によると、SH基を有するタンパクと100mM Phosphate buffer (pH6.5)中で 4C, 4hrsで反応させれば良いようです。 最適なタンパク濃度・PEG-malemide濃度はお調べください。また未反応物と生成物を分離する方法も検討してください。

(無題) 削除/引用 No.6042-2 - 2017/06/11 (日) 14:09:39 - mon PEG-malemideで何がしたいのですか？

PEG-malemide 削除/引用 No.6042-1 - 2017/06/11 (日) 13:39:08 - みーる PEG-malemide in vitroの操作がうまくいきません。 どなたかプロトコールを教えていただけませんか？

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