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TLCでの脂質分析で、何のスポットであるかわからない
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No.6029-TOPIC - 2017/06/07 (水) 18:05:19 - lipid
脂質の素人で、調べてもよくわからない為に、ご存知の方の知恵をお貸しください。
脂質の蓄積が高まるとにらんでいる試薬で刺激した肝細胞から、
脂質を抽出し、silica gel TLCで分画しています。
展開溶媒は、ヘキサン:ジエチルエーテル:酢酸=80:20:1です。
発色剤は、硫酸銅をリン酸で溶解したものです。
TG(+DG,MG)のスポットと、コレステロールのスポットの間に出るものが何であるか知りたいです。
上記条件では、明確には2つほど確認できます。
TGの割と近い下と、コレステロールの割と近い上に出るスポットです。
どのようなものが該当すると思われますか?
ご存知の方、宜しくお願いします。
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No.6029-8 - 2017/06/08 (木) 09:51:15 - lipid
AP様
qq様
双方の方、的確なご指摘ありがとうございました。
薬物で刺激すると、FFA(の取り込みですかね)が細胞内で上昇し、
それに伴いTGの蓄積が濃度依存でみられるという、
まあ、そうでしょというのが正しく観察できました。
意外と、TGに至る前のDGの量に変化がなく、
FFAとTGのみが顕著に増えたのが意外でしたが。。。
助かりました!
ありがとうございました。
(無題)
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No.6029-7 - 2017/06/07 (水) 19:15:41 - qq
リンク先がトップになってましたね。
analysisの中性脂質の分析で、コレステロールエステルの分析例が、比較的類似したTLCでした。
(無題)
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No.6029-6 - 2017/06/07 (水) 19:09:07 - AP
>当方の条件ですと、TG=MG=DGとも同一のRfで、分ける事が難しです。
それってひどくなーい、
(無題)
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No.6029-5 - 2017/06/07 (水) 18:31:31 - lipid
AP様
失礼いたしました。
コレステロールは、DGの間より少し上側に出ています。
MGは移動せずですかね?
(無題)
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No.6029-4 - 2017/06/07 (水) 18:28:45 - lipid
AP 様
>DGは二本出るはず(sn-1,2とsn-1,3)ということを念頭に同定しているだろうか。コレステロールのスポットは、DG二本のすぐ上あたりにでると思う(条件によっては二本の間にでるという場合もあるらしい)。
早々にご教授ありがとうございます。
当方の条件ですと、TG=MG=DGとも同一のRfで、分ける事が難しです。
PCでやってみた事からですが。。。。
DGの二本は了解してます。
殆ど一本線が入る程度の、Rfの差しかありません。。。
また、コレステロールより上です。。。。
qqさま
見てみます!
(無題)
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No.6029-3 - 2017/06/07 (水) 18:21:31 - AP
上の方は遊離脂肪酸(FFA)じゃないかな。
DGは二本出るはず(sn-1,2とsn-1,3)ということを念頭に同定しているだろうか。コレステロールのスポットは、DG二本のすぐ上あたりにでると思う(条件によっては二本の間にでるという場合もあるらしい)。
(無題)
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No.6029-2 - 2017/06/07 (水) 18:11:18 - qq
http://www.cyberlipid.org/cyberlip/home0001.htm
こんなのがある
TLCでの脂質分析で、何のスポットであるかわからない
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No.6029-1 - 2017/06/07 (水) 18:05:19 - lipid
脂質の素人で、調べてもよくわからない為に、ご存知の方の知恵をお貸しください。
脂質の蓄積が高まるとにらんでいる試薬で刺激した肝細胞から、
脂質を抽出し、silica gel TLCで分画しています。
展開溶媒は、ヘキサン:ジエチルエーテル:酢酸=80:20:1です。
発色剤は、硫酸銅をリン酸で溶解したものです。
TG(+DG,MG)のスポットと、コレステロールのスポットの間に出るものが何であるか知りたいです。
上記条件では、明確には2つほど確認できます。
TGの割と近い下と、コレステロールの割と近い上に出るスポットです。
どのようなものが該当すると思われますか?
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