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PCRで生じたヘテロduplexはそのままベクターにクローニング?
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No.5966-TOPIC - 2017/05/10 (水) 09:27:01 - ヘテロ
表題にある通りなのですが、PCRで生じたヘテロduplexはそのままTベクターにクローニングされてしまうでしょうか?
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No.5966-5 - 2017/05/11 (木) 14:34:15 - ヘテロ
みんな。ありがとね。
(無題)
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No.5966-4 - 2017/05/10 (水) 14:55:11 - 中年
「クローニング」の用語法はともかく、仰っているのはPCR産物をTベクターにライゲーションしてコンピテントセルを形質転換したら、シングルコロニー由来のプラスミドの配列が2種類の混合物だったということでしょうか。
そういうことは起こります。ただし、ヘテロduplexが複製されてstrand separationされたというより、複数のプラスミドが一つのコンピテントセルに入ったせいだと思います。
(無題)
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No.5966-3 - 2017/05/10 (水) 10:41:25 - AP
heteroduplexが細胞内で、複製や修復機構をを経ても維持されるような機構があるなら、応用の可能性も含め大発見だな。
(無題)
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No.5966-2 - 2017/05/10 (水) 10:02:13 - おお
べくたーにはライゲーションされますが、大腸菌内で複製されるとどうなりますか?またミスマッチを修復するような機構もありますよ。
PCRで生じたヘテロduplexはそのままベクターにクローニング?
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No.5966-1 - 2017/05/10 (水) 09:27:01 - ヘテロ
表題にある通りなのですが、PCRで生じたヘテロduplexはそのままTベクターにクローニングされてしまうでしょうか?
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