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(無題) 削除/引用 No.5959-3 - 2017/05/04 (木) 07:36:41 - おお 細胞膜っていうのがよくわからないのだけど、、、ある細胞特異的なリン脂質などを含む細胞膜（PSとかコレステロールとか含んだもの）を膜のままで回収したいのか、、、その特異的なリン脂質などを膜の構造とか関係なく精製したいのか、、、 とか質問に書いていることがよくわかっておりません。。。

(無題) 削除/引用 No.5959-2 - 2017/05/04 (木) 07:03:32 - い plasma membraneの精製キットはいくつか市販されていて、組織サンプルでも適用できます。培養細胞からだど、それなりの量の細胞膜を得るにはかなりの細胞数が必要になるので、組織の方がむしろいいです。ただ分画後、可溶化のために界面活性剤が必要になるとおもうので、膜の構造は壊れます。けんだく液でIPもやってできないことはないと思いますが、不溶物があるなかでおこなうのでBGが高くなるとおもうので、コントロール抗体のビーズでのIPを並行でやるはもちろんですが、すくなくともビーズの回収に遠心しなくてよいように磁気ビーズでやるなどの工夫は必要になるとおもいます。 生細胞で分画を行うならば組織塊からの細胞分散液はさいきんいろいろ市販されて、細胞へのダメージがすくないことを謳っているものもあったとおもうので調べて検討下さい。

特定の細胞の細胞膜の分離法 削除/引用 No.5959-1 - 2017/05/03 (水) 15:36:57 - 1618 いつも拝見させてもらってます。 組織中のある細胞のみに由来する細胞膜の生成を試みております。 最初はFACS,MACSによる細胞の分離を試みたのですが、 組織分散の過程で死滅してしまい、細胞レベルでの分離は困難なことが 分かっております。 そのため、一旦wholeの細胞膜を採取し、そこから特異的抗体+ビーズ等で釣ってくるような手法を試みようとしていますが、文献等で見当たらないのを懸念しております。 このような目的の際に、他に利用できそうな手法がありましたらご教授願いたいです。

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