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(無題) 削除/引用 No.5956-4 - 2017/05/23 (火) 10:08:49 - こば マニュアルを見ましたがサンドイッチELISAでしたね。てっきりプレートにダイレクトに固相化するものと思っていました。サンドイッチELISAならバックグラウンドはダイレクトに固相化するより格段に低く感じます（いくつかキットを使った感触です、コラーゲンではありませんが）。 無知で申し訳ないのですがFBSにI型コラーゲンって入っているんですか？I型コラーゲンは結合組織なので血液中にはないと思うのですが。

(無題) 削除/引用 No.5956-3 - 2017/05/14 (日) 08:47:24 - YK コバ様、トピを立てた者です。ありがとうございます。 コパ様の言われる固相化というのはキャプチャー抗体のことでしょうか？ 実はその後、R＆Dシステムズのコラーゲン1定量（自作）ELISAキットを購入しました。 Human Pro-Collagen I alpha 1 DuoSet ELISA https://www.rndsystems.com/products/human-pro-collagen-i-alpha-1-duoset-elisa_dy6220-05 内容は、キャプチャー抗体、検出用抗体、二次抗体、standardのみでした。 この場合、固相化はキャプチャー抗体になるかと思います。

(無題) 削除/引用 No.5956-2 - 2017/05/14 (日) 08:40:52 - こば 質問の主旨と異なりますが、参考までに。 普段からI型コラーゲンをELISAにかけてます。固相化は1μg/mlまでは大丈夫なのですが、3μg/mlくらいから怪しくなり、10μg/ml以上で非特異的反応が著しくなります。

1型コラーゲン（ヒト）のELISAについて教えてください。 削除/引用 No.5956-1 - 2017/05/03 (水) 08:02:08 - YK 現在、ヒト細胞から産生分泌される1型コラーゲンの定量を考えています。 培養上清のウエスタンブロットは、FBSが入っているために難しそうです。 そこでELISAのシステムがワークすればよいなと思っています。 いくつかの会社から、ELISAキットが売られていますが、みなさまの中に試された方いらっしゃいますでしょうか？何分、非常に高価な買い物になりますので、使用感等をお聞かせ願えますと嬉しいです。 また、FBS中にもコラーゲン1型が含まれておりバックが高くなるよ、というようなクリティカルなコメント等もいただけるとすごく嬉しいです。 とても稚拙なトピックを立ててしまい、誠に恐縮していますが、どうぞよろしくお願いいたします。 YK

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