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細胞分裂期におけるCre-ERTの挙動は? トピック削除
No.5877-TOPIC - 2017/04/01 (土) 17:32:08 - クレ
タモキシフェン誘導的に特定の遺伝子を欠損させる手法として、
「Cre-ERT」を用いる方法がございますが、

MEF細胞などでこの手法を用いる場合、
分裂期などで核膜が消失したときに、
CreがloxPを認識して組換えを行う可能性は無いのでしょうか?
もしくは、核膜が再度現れる際に運良く核内にCre-ERTが入ってしまう可能性はないのでしょうか?

タモキシフェンがCre-ERTを核内へ移行させる(HSPとの結合を乖離させる?)機能を持つことから、
上記の問題点があるのではないかと考えました。


なにかご存知の方はいらっしゃらないでしょうか。
よろしくお願い申し上げます。
 
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(無題) 削除/引用
No.5877-2 - 2017/04/02 (日) 18:53:02 - おお
明確な回答ではないですが、分裂時の染色体はかなりしっかりとヒストンでDNAがパックッキングされていて、蛋白が容易にアクセスできる状態ではないように感じます。

細胞分裂期におけるCre-ERTの挙動は? 削除/引用
No.5877-1 - 2017/04/01 (土) 17:32:08 - クレ
タモキシフェン誘導的に特定の遺伝子を欠損させる手法として、
「Cre-ERT」を用いる方法がございますが、

MEF細胞などでこの手法を用いる場合、
分裂期などで核膜が消失したときに、
CreがloxPを認識して組換えを行う可能性は無いのでしょうか?
もしくは、核膜が再度現れる際に運良く核内にCre-ERTが入ってしまう可能性はないのでしょうか?

タモキシフェンがCre-ERTを核内へ移行させる(HSPとの結合を乖離させる?)機能を持つことから、
上記の問題点があるのではないかと考えました。


なにかご存知の方はいらっしゃらないでしょうか。
よろしくお願い申し上げます。

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