マウスの脳のパラフィン切片を作成しているのですが、
切るとヒビが入ってしまい、脱水がうまくいっていないのではないかと考えています。
PBSで脱血後4%PFAにて灌流固定し、脳を7mm程度にブレインスライサーで切って10%NBFでO.N.後に手動で下記の脱水をしています。
PBS (45min)
PBS (45min)
70%EtOH (1h)
80%EtOH (1h)
90%EtOH (1h)
95%EtOH (1h)
99.5%EtOH (1h)
99.5%EtOH (1h)
99.5%EtOH (1h)
キシレン (1h)
キシレン (1h)
パラフィン (1h)
パラフィン (1h)
その後冷やしてブロック化
脱水についてご教授ください。
よろしくお願いいたします。 |
|