Bio Technical フォーラム

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ノックダウン条件検討 トピック削除
No.5846-TOPIC - 2017/03/18 (土) 00:08:07 - Y
門外漢のため的外れな質問かもしれませんがご容赦ください。
現在siRNAによるノックダウンを考えています。
siRNA濃度、導入試薬濃度、導入時間等の条件検討がまず必要かと存じますが、そこで一つ疑問があります。
最終的には24wellプレートで特定遺伝子をノックダウンした細胞で実験を行いたいのですが、条件検討も24wellで行うと金銭的に厳しいです。
そこで条件検討は96wellで行い、条件が決定した後、24wellプレートで同条件でノックダウン効率を確認しようかと考えています。このような方法は一般に許容されるのでしょうか?また許容されないならば、なにかアドバイスをいただければ幸いです。
 
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(無題) 削除/引用
No.5846-5 - 2017/03/21 (火) 09:25:47 - Y
ありがとうございます。
参考にさせていただきます。

(無題) 削除/引用
No.5846-4 - 2017/03/18 (土) 09:54:43 - ものくろ
そうですね。すべて面積あたりの細胞数の数は同じにしています。

(無題) 削除/引用
No.5846-3 - 2017/03/18 (土) 07:53:55 - Y
ありがとうございます。
96wellから24wellに変えた場合、siRNA濃度、導入試薬濃度、導入時間は同じにできますが、細胞数はどのようにしているのでしょうか?
面積あたりの数を同じにすればよろしいでしょうか?

(無題) 削除/引用
No.5846-2 - 2017/03/18 (土) 00:54:44 - ものくろ
それでやっています。

ノックダウン条件検討 削除/引用
No.5846-1 - 2017/03/18 (土) 00:08:07 - Y
門外漢のため的外れな質問かもしれませんがご容赦ください。
現在siRNAによるノックダウンを考えています。
siRNA濃度、導入試薬濃度、導入時間等の条件検討がまず必要かと存じますが、そこで一つ疑問があります。
最終的には24wellプレートで特定遺伝子をノックダウンした細胞で実験を行いたいのですが、条件検討も24wellで行うと金銭的に厳しいです。
そこで条件検討は96wellで行い、条件が決定した後、24wellプレートで同条件でノックダウン効率を確認しようかと考えています。このような方法は一般に許容されるのでしょうか?また許容されないならば、なにかアドバイスをいただければ幸いです。

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