Bio Technical フォーラム

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胎仔ラットの脊髄・固定法について トピック削除
No.5823-TOPIC - 2017/03/09 (木) 16:27:54 - 紺
はじめまして，いつも参考にさせていただいております．

現在，妊娠22日目ラットの胎児の脊髄の観察しようと考えています．具体的には，横断面を観察したいのですが．既報のやり方がいくつかあったり細かい部分がわからなかったりしたので，どんな小さいことでも良いので教えていただけると助かります．

（1）灌流固定
ラットを母体ごと灌流固定したのち胎仔を取り出し，脊髄の必要な部分を含むように切り出し→OCT包埋→凍結→薄切
胎仔をそれごと切断することができるのか否かが鍵だと思いますが，いかがでしょうか？

（2）ホールマウント
やったことがないので，できるかどうかわからないのですが，全体を見ることができて良さそうだと思いました．浸透性を確保するのが難しそうで条件検討に時間がかかりそうだなと感じています．いかがでしょうか？ない，この場合も灌流固定は行うのでしょうか？

（3）後固定
灌流固定せず胎児を取り出し，脊髄の必要な部分を含むように切り出し→OCT包埋→凍結→薄切→固定
薄切後に固定するやり方はいかがでしょうか？

どのやり方をどう組み合わせるのが良いのか，ご教示いただきたく存じます．
　
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胎仔ラットの脊髄・固定法について 削除/引用
No.5823-1 - 2017/03/09 (木) 16:27:54 - 紺
はじめまして，いつも参考にさせていただいております．

現在，妊娠22日目ラットの胎児の脊髄の観察しようと考えています．具体的には，横断面を観察したいのですが．既報のやり方がいくつかあったり細かい部分がわからなかったりしたので，どんな小さいことでも良いので教えていただけると助かります．

（1）灌流固定
ラットを母体ごと灌流固定したのち胎仔を取り出し，脊髄の必要な部分を含むように切り出し→OCT包埋→凍結→薄切
胎仔をそれごと切断することができるのか否かが鍵だと思いますが，いかがでしょうか？

（2）ホールマウント
やったことがないので，できるかどうかわからないのですが，全体を見ることができて良さそうだと思いました．浸透性を確保するのが難しそうで条件検討に時間がかかりそうだなと感じています．いかがでしょうか？ない，この場合も灌流固定は行うのでしょうか？

（3）後固定
灌流固定せず胎児を取り出し，脊髄の必要な部分を含むように切り出し→OCT包埋→凍結→薄切→固定
薄切後に固定するやり方はいかがでしょうか？

どのやり方をどう組み合わせるのが良いのか，ご教示いただきたく存じます．
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