Bio Technical フォーラム

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ATPase染色　色が薄い．．． トピック削除
No.5822-TOPIC - 2017/03/09 (木) 15:42:56 - ノブ〜
現在、ATPase染色を以下のプロトコールで行っています。モザイクになるんですが、色がとても薄く、どうしたらはっきりと染まるのか、コツなどありましたら教えてください。よろしくお願いします。

@酸性前処理液（pH4.3、4.4）　22℃で5分
A0.1M　sod.barbital 4ml
0.18M CaCl₂　　2ml
　蒸留水　　14ml
B0.1M　sod.barbital 4ml
0.18M CaCl₂　　2ml
　蒸留水　　14ml
　ATP　disod. salt 50mg
pH9.5
37℃で45分反応
C1%CaCl₂　10分
D水洗
E2%CoCl₂　3分
F0.01M sod.barbital液で8回
G水洗　2〜3分
H黄色硫化アンモニウム　1分
➉水洗　9分
J脱水
K封入
　
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ATPase染色　色が薄い．．． 削除/引用
No.5822-1 - 2017/03/09 (木) 15:42:56 - ノブ〜
現在、ATPase染色を以下のプロトコールで行っています。モザイクになるんですが、色がとても薄く、どうしたらはっきりと染まるのか、コツなどありましたら教えてください。よろしくお願いします。

@酸性前処理液（pH4.3、4.4）　22℃で5分
A0.1M　sod.barbital 4ml
0.18M CaCl₂　　2ml
　蒸留水　　14ml
B0.1M　sod.barbital 4ml
0.18M CaCl₂　　2ml
　蒸留水　　14ml
　ATP　disod. salt 50mg
pH9.5
37℃で45分反応
C1%CaCl₂　10分
D水洗
E2%CoCl₂　3分
F0.01M sod.barbital液で8回
G水洗　2〜3分
H黄色硫化アンモニウム　1分
➉水洗　9分
J脱水
K封入
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