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ありがとうございます 削除/引用 No.5808-4 - 2017/03/04 (土) 23:24:24 - NT ブロッキング剤のことは思いつきませんでした。 他のブロッキング剤、ブロッキングなし、一次抗体後にブロッキング、でやってみます。 ありがとうございます。

(無題) 削除/引用 No.5808-3 - 2017/03/04 (土) 14:29:35 - AP 血清やBSAなど生物由来タンパク質性のブロック剤だと、内在的にニトロ化チロシンを含んでいるかもしれない。炎症とか酸化ストレスなど原料動物の飼育環境で大きく影響をうけるのかも。 非生物由来のブロッキング剤で試すとか、いっそのことブロック剤抜きでもいいかも。モノクロなら少なくとも一次抗体反応のまではブロック必要ないことも多いです。必要なら一次抗体反応後にブロッキングしてから二次抗体へ、

(無題) 削除/引用 No.5808-2 - 2017/03/04 (土) 09:00:49 - AP ブロッキング剤に反応してる？

免染でスライドグラスが染まる 削除/引用 No.5808-1 - 2017/03/04 (土) 08:52:15 - NT PFA固定、パラフィン包埋したモルモット脳の免染をしています。 1次抗体はnitrotyrosine(モノクローナル抗体)、alkaline phosphatase染色を行っています。 何回も試し染めをしていますが、毎回、組織切片の周囲のスライドグラス（組織切片がのっていない部分、組織切片とPAPペンとの間の領域）がなぜか強く染まってしまい、さらに、その染色が組織切片そのものにも浸潤してくるような染まり方をしてしまいます。 別の1次抗体では起こりませんでした。 何が起こっているかわかる方いらっしゃいませんか。

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