Bio Technical フォーラム

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リポフェクタミンとKSRについて トピック削除
No.5785-TOPIC - 2017/02/24 (金) 18:29:40 - JK
リポフェクタミンで遺伝子を培養細胞に導入しようと考えてます。
ふと思ったのですが、リポフェクション法で遺伝子を導入する場合にはFBSフリーの培地で行っていましたが、Knockout serum replacementの場合はKSRフリーにした方がよいのでしょうか？
KSRって遺伝子の導入効率に影響があるのか、ご存じの方おりますか？
　
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No.5785-4 - 2017/02/27 (月) 18:38:26 - JK
ためしにKSRあり、なしで培養細胞にトランスふぇくとしてみたら、どちらも導入効率に差がみられませんでした。
KSRなら導入効率に影響しないのか、使った培養細胞が良かったのかはまだわかりませんが、おおさんのご意見も尊重して実験を進めていこうと思います。
ありがとうございました。

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No.5785-3 - 2017/02/26 (日) 07:03:22 - おお
どの過程で血清を考えているのかちょっとわからないなと思ったのですが、血清抜きでDNAとまぜて、通常の増殖培地に加えるということはよくあります（特に効率がそれでもある程度あって実験に使えると判断できるなら）。

(無題) 削除/引用
No.5785-2 - 2017/02/26 (日) 06:59:40 - おお
蛋白成分があると効率が落ちそうな気がするのだが、、、KSR抜いてどの程度細胞が思ったように維持できるかもネックになるし。OPTIMEMなど使えるんであったら、（蛋白成分は入っているのだけど）増殖因子みたいなのがはいっていて細胞死がなるだけ回避できるようにはなっているし、リポフェクタミンなどでは推奨されているのではと（実際細胞を増殖させるには１ー２％の血清はがいるそうですが、TFのときは入れずに維持できるなら理想的ですから）。

リポフェクタミンとKSRについて 削除/引用
No.5785-1 - 2017/02/24 (金) 18:29:40 - JK
リポフェクタミンで遺伝子を培養細胞に導入しようと考えてます。
ふと思ったのですが、リポフェクション法で遺伝子を導入する場合にはFBSフリーの培地で行っていましたが、Knockout serum replacementの場合はKSRフリーにした方がよいのでしょうか？
KSRって遺伝子の導入効率に影響があるのか、ご存じの方おりますか？
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