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DCFH-DAを利用した線虫C.elegans体内のROS状態の測定 トピック削除
No.5771-TOPIC - 2017/02/19 (日) 16:43:46 - M1
線虫体内のROS状態を見るためにDCFH-DAを利用しています。
ですが、DCFH-DAの終濃度5,10,20,40μMいずれの濃度でも染色されませんでした。

DCFH-DAの投与はソーキング法を用い、時間は30分です。
その後、1mM H2O2 をソーキング法で投与し、蛍光観察をしています。

論文では5,10μMで染色されていたので実験操作に問題があると考えております。
詳細なやり方をご存知の方は教えて頂けると嬉しいです。
よろしくお願いします。
　
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(無題) 削除/引用
No.5771-2 - 2017/02/20 (月) 00:30:31 - w
ポジコンがあるといいでしょう。

DCFH-DAを利用した線虫C.elegans体内のROS状態の測定 削除/引用
No.5771-1 - 2017/02/19 (日) 16:43:46 - M1
線虫体内のROS状態を見るためにDCFH-DAを利用しています。
ですが、DCFH-DAの終濃度5,10,20,40μMいずれの濃度でも染色されませんでした。

DCFH-DAの投与はソーキング法を用い、時間は30分です。
その後、1mM H2O2 をソーキング法で投与し、蛍光観察をしています。

論文では5,10μMで染色されていたので実験操作に問題があると考えております。
詳細なやり方をご存知の方は教えて頂けると嬉しいです。
よろしくお願いします。
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