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(無題) 削除/引用 No.5751-4 - 2017/02/11 (土) 13:33:22 - おお >BAP処理後、15分間氷上におき、その後、キットを用いて精製を行いました。 問題ないと思います。でキットで精製して回収できたんですよね？

(無題) 削除/引用 No.5751-3 - 2017/02/10 (金) 20:29:26 - AP 氷上だろうがフリーザーだろうが室温だろうが、長く放置したからといって別に問題はないはずだが。製品中にヌクレアーゼのキャリーオーバーが残存している可能性のあった大昔ならともかく、今日では高純度のリコンビナント酵素が普通なので、そういう問題はない。 どういう実験デザインなのか、ライゲーションがうまくいっていないとはどういう状況なのか、説明があればヒントがもらえるかも。

(無題) 削除/引用 No.5751-2 - 2017/02/10 (金) 18:13:00 - たていす ちゃんと覚えていないのですが、BAPよりもCIAPやSAPの方が、失活させやすくて良かったような気がします。

アルカリフォスファターゼ(BAP)処理 削除/引用 No.5751-1 - 2017/02/10 (金) 17:46:01 - 世のため人のため アルカリフォスファターゼ(BAP)処理後の操作について教えて頂きたいのですが、 一般的に、BAP処理は65℃30分(Takara社プロトコル)と言われていますが、 本操作後、精製作業に移ると思います。そのときに、すぐに精製にうつった方が良いのかそれとも、氷上や−20℃で、いくらかおいておいてもよいのか、いかがでしょうか。 どうもライゲーション反応が上手くいっておらず、BAP処理の前後に問題があるかと考察しています。ちなみに、BAP処理後、15分間氷上におき、その後、キットを用いて精製を行いました。 宜しくお願いします。

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