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マウス糞便中IgAの測定(ELISA) トピック削除
No.5743-TOPIC - 2017/02/07 (火) 18:13:21 - あや
マウス糞便中の分泌型IgAをELISAで測定したいです。
予想としては顕著な抗体価の上昇はないので、なるべく希釈することなく糞便上清を回収したいのですが、PBSに添加するものや糞便グラムあたりのPBS量、遠心設定などみなさんどのように決められているのでしょうか。。
 
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(無題) 削除/引用
No.5743-3 - 2017/03/02 (木) 11:06:17 - T2
PBS+プロテアーゼインヒビターを加えて,冷蔵庫でしばらく静置したのちに,ホモジナイズし,遠心でデブリを落とし,回収した上清を希釈して使用していました。

マウスストレインや飼育環境により糞便中のIgAは変化することが報告されています。また,ELISAキットによっても報告されている定量値とかなり異なる値がでるので,あやさんの持っているサンプルとキットに合う希釈倍率を設定することをお勧めします。

また,糞の水分含有量もばらつきを与えるので,差が大きくないと考えられる場合は,糞の回収のタイミングや状態等も結果に影響してきます。私は乾燥重量を基準としていました。

(無題) 削除/引用
No.5743-2 - 2017/02/09 (木) 23:23:37 - たろう
糞便グラムあたりのPBS量に関しては、糞便の9倍量ぐらいのPBSが相場では?

マウス糞便中IgAの測定(ELISA) 削除/引用
No.5743-1 - 2017/02/07 (火) 18:13:21 - あや
マウス糞便中の分泌型IgAをELISAで測定したいです。
予想としては顕著な抗体価の上昇はないので、なるべく希釈することなく糞便上清を回収したいのですが、PBSに添加するものや糞便グラムあたりのPBS量、遠心設定などみなさんどのように決められているのでしょうか。。

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