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(無題) 削除/引用 No.5683-9 - 2017/01/18 (水) 16:15:27 - おお 差し支えなければ細胞名を開示してみてはどうでしょうか。 細胞によってはコンフルになってコンタクトインヒビッションがかかってから継代するものもあります。 まあ変則的に日によっては撒く数を変えてもいいですけど継代数の目安が必要であれば結構めんどくさいです。 ８０％コンフを剥がしてそのまま全て新しいディッシュに植え替えたこともあります。少なく撒くより多く撒いたときのほうがたしかにトラブルは少ないです。

(無題) 削除/引用 No.5683-8 - 2017/01/18 (水) 15:57:53 - む ＞けらさん そうですね、ありがとうございます。 ＞cellさん はい、実験用のplateに播種ということです。 なるほど、複数から剥がすのは頭に浮かびませんでした。参考になります。ありがとうございます。 助かりました。また何かございましたら、よろしくお願いいたします。

(無題) 削除/引用 No.5683-7 - 2017/01/18 (水) 11:59:20 - cell ＞今現在は7〜8割で、明日まで待つと少し混みすぎてしまう ＞１：４だとおそらく20、21あたりに継代が来てしまう、 倍化時間が２４時間くらいでしょうか。 「播種をしたい」というのは実験用のwell plateに播種という意図であっていますか？ ・本日１：４に継代して２０日にplate播種 ・本日１：２に継代して１９日にplate播種 ・本日１：６に継代して複数のディッシュから必要量剥がす こんな感じでしょうか？　どちらにしてもwellにまくときには細胞数をカウントすると思うので、複数のディッシュから剥がす方法でもいいと思いますよ。

(無題) 削除/引用 No.5683-6 - 2017/01/18 (水) 11:57:40 - けら そんなに気になるなら、１：２と１：６で播けばいいと思います。

(無題) 削除/引用 No.5683-5 - 2017/01/18 (水) 11:43:43 - む 日にちを書いたら「土日は来たくない」と言っているかのように見えたのですが、決してそのようなわけではないことを追記させてください……(^^;)かなりどうでもいいことなのですが……笑

(無題) 削除/引用 No.5683-4 - 2017/01/18 (水) 11:35:27 - む ＞cellさん 分かりやすいご回答ありがとうございます。 記載し忘れてしまいましたが接着細胞です。 >・「ギチギチになって育たず細胞にダメージ？良くない影響を与えてしまうのかなと」←これ自体は大まかには合っていますが >「まだ対数増殖の序盤なのにギチギチになって」←この部分は違います。ギチギチになっていたらそれはすでに対数増殖期を超えている状態です。 こちらを読んで気づきましたが、細胞増殖について勘違いしていたようです。理解ができました。ありがとうございます。 実験に関しては1/19、20、23のどこかで播種をしたいのですが。今現在は7〜8割で、明日まで待つと少し混みすぎてしまうと良くないかと思いまして。１：６にするのはちょっと不安（そんなに多くないので少なすぎるかもしれない）、１：４だとおそらく20、21あたりに継代が来てしまう、と考えましたために、このようなことになりました。

(無題) 削除/引用 No.5683-3 - 2017/01/18 (水) 11:12:25 - cell 追記 ・実験に使いたいのはいつのご予定で、いま顕微鏡観察で何パーセント程度でしょうか？ ・何日ごとに１対○で継代、とシートに推奨が載せられていますが、培養環境やちょっとした試薬の違いが響いたりして増殖具合が違うことも多いので、自分で観察して臨機応変に対応する方が良いかと思います。 ・「ギチギチになって育たず細胞にダメージ？良くない影響を与えてしまうのかなと」←これ自体は大まかには合っていますが 　「まだ対数増殖の序盤なのにギチギチになって」←この部分は違います。ギチギチになっていたらそれはすでに対数増殖期を超えている状態です。 初めての細胞培養は不安なことだらけなものですが、すぐに慣れると思います。 実験上手くいくといいですね。

(無題) 削除/引用 No.5683-2 - 2017/01/18 (水) 10:57:20 - cell 接着細胞でしょうか？ １：２で継代すること自体には問題はありませんが、継代した時点で８０％コンフルを超えるような状態になるのであれば細胞の調子は悪くなると思います。 まぁ１００％コンフルのディッシュから剥がして継代しても１：２なら５０％なので大丈夫と思いますが…。 細胞株に依るところもあるので、一般に使われていないような特殊なものなら、指導教官・実験責任者と相談した方が無難です

細胞の継代における指示された割合を外れたら 削除/引用 No.5683-1 - 2017/01/18 (水) 09:55:53 - む いつも参考にさせていただいております。 細胞培養について質問させてください。 例えば１：４〜１：６で継代する、と書かれた細胞に対し、１：２などで継代したらまずいでしょうか？以後育ちが悪くなったりするのでしょうか？ 希釈しすぎでは育たないことは分るのですが、果たして多く播いた場合良くないことが起きてしまうのか気になりました。（通常通り育つのであれば早く次の継代が来るために培地がもったいない、作業が増えるということはあると思いますが） 少し考えたのは誘導期、対数増殖期、定常期と細胞が増殖していきますが、まだ対数増殖の序盤なのにギチギチになって育たず細胞にダメージ？良くない影響を与えてしまうのかなと考えてみたのですが、この考え方はあっているのでしょうか…。 実験の日程を決めるにあたって継代のタイミングが少し良くないために、このようなことを起こそうかと考えた次第であります。 細胞培養初心者のため、とても初歩的で申し訳ございませんが、調べ方が悪いのか答えが見つからず。聞ける相手も今現在ラボにおりません。すみませんが、よろしくお願いいたします。

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