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Stable cloneを使ったsiRNAのKDの検証
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No.5652-TOPIC - 2017/01/05 (木) 11:58:52 - ガロ
siRNAがノックダウンの効果があるのか、Stable cloneを使って調べることはあるのでしょうか?
例えば、FLAGを付けた目的の遺伝子のcDNAを培養細胞に導入してStable cloneを作り、これにsiRNAを導入してノックダウンの効果があるかどうか。
現在、目的の遺伝子が発現するcell lineがなくて困ってます。
ある組織では発現が確認できたのですが・・・。
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No.5652-3 - 2017/01/05 (木) 14:30:49 - ガロ
方法の一つとしては考えられるのですね。
目的の遺伝子が発現している細胞株がみつかれば一番助かるのですが、見つからなければstableでの検討も考えてみようと思います。。。
(無題)
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No.5652-2 - 2017/01/05 (木) 12:15:46 - おお
一つの方法論としてありえるやり方だとは言えると思います。
そのStableでもとの細胞で比較して見たい形質がちゃんと動いていることが前提になるのではと思います。まあやってみないとわからない部分もあるというのは否定しませんけど。
たしかにStableにすることにより2次的な変化などいろデメリットがありますけど、それはすでに考慮した上でのはなしと思われますので細かいことは書かなくてもいいでしょう。
Stable cloneを使ったsiRNAのKDの検証
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No.5652-1 - 2017/01/05 (木) 11:58:52 - ガロ
siRNAがノックダウンの効果があるのか、Stable cloneを使って調べることはあるのでしょうか?
例えば、FLAGを付けた目的の遺伝子のcDNAを培養細胞に導入してStable cloneを作り、これにsiRNAを導入してノックダウンの効果があるかどうか。
現在、目的の遺伝子が発現するcell lineがなくて困ってます。
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