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酵母を96wellで培養したときの凝集 トピック削除
No.5601-TOPIC - 2016/12/07 (水) 10:20:34 - 酵母使い
お世話になっております。
酵母をフラスコや試験管で培養すると、培養液中に均一に分散するのですが、96wellで培養すると凝集してしまいます。
溶液が揺れにくいこと、何らかのストレスが関係しているのでしょうか。

同じような経験をされた方、解決された方など、いらっしゃいましたらお話しをお聞かせください。
 
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No.5601-9 - 2016/12/07 (水) 11:19:17 - mon
96wellというのは、deep well plateですか?浅いplateでしょうか?
丸底でもwell上部が四角いdeep well plate(+通気性シール)で激しく撹拌すれば良いのでは??
大腸菌ではOD600=8~16程度(培地による)まで増えますけど。。

(無題) 削除/引用
No.5601-8 - 2016/12/07 (水) 11:03:43 - 酵母使い
弘法様、おお様

ありがとうございます。マンノース添加により解決するかどうか、またそれによる実験系への影響を調べてみたいと思います。

お二方、お早いレスポンスありがとうございました。

(無題) 削除/引用
No.5601-7 - 2016/12/07 (水) 11:00:18 - 弘法
OD値を測ることが目的の実験(growth curve?)であれば、そのままでは実験できませんね。

培地を変えるか菌株を変えれば解決するかもしれませんが、それができるかどうかは実験の内容によりけりでしょうからね。

(無題) 削除/引用
No.5601-6 - 2016/12/07 (水) 10:52:38 - 弘法
株にもよるのですが、栄養が枯渇したり生育環境が悪くなったりすると凝集することはあります。細胞壁のマンノース多糖タンパク質を介した結合なので、培地にマンノースを沢山入れれば阻害することはできると思います。実験の目的にも依ると思いますが、そのままでは問題があるということでしょうか。

(無題) 削除/引用
No.5601-5 - 2016/12/07 (水) 10:52:34 - 酵母使い
>解決というのは

解決したいのは、OD値の測定の際に、溶液中に分散していないと困るという点です。
ピペッティングで解決しようと思えば可能なのですが、策がありましたら、と思いまして。

(無題) 削除/引用
No.5601-4 - 2016/12/07 (水) 10:50:29 - 酵母使い
おお様

ありがとうございます。単純に考えると、フラスコで旋回培養を行った時と、ウェルシェーカーで培養したときは、どちらも液の動き方は旋回なので同じだと思うのですが、ウェルーシェーカーで培養したときは、溶液が濁らず、明らかに中心に集まっているような状況です。

(単純に考えると、というのは、あくまで単純すぎますが)

(無題) 削除/引用
No.5601-3 - 2016/12/07 (水) 10:45:21 - おお
解決というのは酵母の生理状態が悪いという判断で、どうしたら改善するかという話ですか?それとも違う次元でなにか不都合があるとお考えなのですか?

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No.5601-2 - 2016/12/07 (水) 10:38:37 - おお
ほんとに塊になってますか? 懸濁状態でも真ん中によってくる傾向があるんじゃないかと経験上思っています。酵母の性質というより溶液の対流とか動きに依存するのではないかと。

酵母を96wellで培養したときの凝集 削除/引用
No.5601-1 - 2016/12/07 (水) 10:20:34 - 酵母使い
お世話になっております。
酵母をフラスコや試験管で培養すると、培養液中に均一に分散するのですが、96wellで培養すると凝集してしまいます。
溶液が揺れにくいこと、何らかのストレスが関係しているのでしょうか。

同じような経験をされた方、解決された方など、いらっしゃいましたらお話しをお聞かせください。

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