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微量RNAの逆転写キット
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No.5589-TOPIC - 2016/11/30 (水) 16:35:21 -
大学生
微量のRNAをリアルタイムPCRで取りたいのですが、研究室で逆転写できるRNAの量が100 ng/µl〜となっています。
この量の100分の1ほどのRNA量しか取れず、そこから逆転写するために逆転写のキットを検索し探しているのですが、どのキットが良いのかわかりません。
RNAの量が少なくても逆転写できるおすすめのキットを教えていただけないでしょうか。
よろしくお願いいたします。
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No.5589-2 - 2016/11/30 (水) 19:21:05 - AP
いや、オーバースケールだとしても不都合ないと思うけど。
RNAが微量であっても、そのシステムの標準スケールでやればいい。
経験上、微量だからといってスケールダウンしたり酵素・基質量を下げたりすると失敗する(たぶん酵素の性質で酵素濃度を下げると著しく反応が進まなくなる)。
もし、プライマー別添のシステムならプライマー量を下げたりしたほうがいいかもしれないけれど(ランダムプライマーの場合、量が多いと平均鎖長が短くなるかも)、定量PCRなんかの目的であれば気にしなくていいと思うよ。
微量RNAの逆転写キット
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No.5589-1 - 2016/11/30 (水) 16:35:21 -
大学生
微量のRNAをリアルタイムPCRで取りたいのですが、研究室で逆転写できるRNAの量が100 ng/µl〜となっています。
この量の100分の1ほどのRNA量しか取れず、そこから逆転写するために逆転写のキットを検索し探しているのですが、どのキットが良いのかわかりません。
RNAの量が少なくても逆転写できるおすすめのキットを教えていただけないでしょうか。
よろしくお願いいたします。
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