Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「新しいトピックを作る」から書き込みをしてください。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

新しいトピックを作る | トピック一覧 | 研究留学ネットに戻る

ひとつ前のフォーラム(readのみ)

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

123456789 トピック削除
No.5583-TOPIC - 2016/11/28 (月) 22:17:18 - 好中球のウェスタンのこと。
今日、好中球ライゼートのウェスタンをしたら、抗マウスIgG抗体(2次抗体)と反応する蛋白質が結構あるんですが(1次抗体なしでやったものでも明瞭なバンドが7本くらいある)、そういうものでしょうか。組織とか他の細胞ではそういうことないので2次抗体がアレという訳ではないです。好中球はちゃんと洗ってるし、好中球はヒト由来でもマウス由来でも同じように出るので血漿成分が混入という事でもないと思います。
 
- このトピックにメッセージを投稿する -



4件 ( 1 〜 4 )  前 | 次  1/ 1. /1


結果報告 削除/引用
No.5583-4 - 2016/11/30 (水) 17:56:32 - 123456789
Blockin剤をBSAからskim milkに変えたところ、2次抗体による非特異的なシグナル(分子量的にはFcγRらしい)が全て消えました。1次抗体の認識する分子のシグナルはちゃんと残ってました。Skim milkにはmilk IgGというのがそれなりの量含まれているらしいので、たぶんそれがFcブロックの働きをしたみたいです。
ありがとうございました。

(無題) 削除/引用
No.5583-3 - 2016/11/29 (火) 21:45:51 - 123456789
ありがとうございます。
やっぱそうですか。FcRですか。Fcブロックしてみます。

(無題) 削除/引用
No.5583-2 - 2016/11/29 (火) 13:23:37 - mon
Fcレセプターが変性していてもIgGに結合するか、多少Renatureしたものが混ざっているかではないでしょうか。。

123456789 削除/引用
No.5583-1 - 2016/11/28 (月) 22:17:18 - 好中球のウェスタンのこと。
今日、好中球ライゼートのウェスタンをしたら、抗マウスIgG抗体(2次抗体)と反応する蛋白質が結構あるんですが(1次抗体なしでやったものでも明瞭なバンドが7本くらいある)、そういうものでしょうか。組織とか他の細胞ではそういうことないので2次抗体がアレという訳ではないです。好中球はちゃんと洗ってるし、好中球はヒト由来でもマウス由来でも同じように出るので血漿成分が混入という事でもないと思います。

4件 ( 1 〜 4 )  前 | 次  1/ 1. /1


パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する
名前 
メール   アドレス非公開
   タイトル 
本文      
設定  クッキーを保存(次回の入力の手間を省けます)
上に上げない(トピックの一覧で一番上に移動させません)
解決(問題が解決した際にチェックしてください)
暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信 

〔使い方〕
  • 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
  • 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
  • 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。