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Taq polymeraseの自家調製について
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No.5536-TOPIC - 2016/11/09 (水) 09:01:21 -
Tak
お世話になります。
マウスのコロニーを沢山抱えるラボは、ゲノテイピング用のTaq polymeraseを自家調製しているとのことを耳にしました。Taq polymeraseのプラスミドをお持ちのようで、それを大腸菌か何かで発現させて、ラフに精製したものを使っているとのことでした。
参考までにもしこのような話をご存知の方がいらっしゃいましたら、後学までに詳しく教えていただけないでしょうか?
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No.5536-8 - 2016/11/09 (水) 19:17:54 - エコ
話に水を差すようで悪いのですが、本当に経済的でしょうか?
そりゃ発現ベクターそのものは安いだろうけど、酵素精製に掛かる手間と人件費、色々勘案すると、一番安いTaqを買って、1サンプルに0.1ulとかの系でPCRを掛けた方が結局安く付くような。品質も安定しているし。
(無題)
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No.5536-7 - 2016/11/09 (水) 13:49:22 - Tak
774Rさん、おおさん、ありがとうございます。
addgeneで売られているのですね!!これは驚きました。
それでは自作すること前提で売られているのですよね。すごくためになりました。ありがとうございました。
余談ですが、昨年の夏にイエローストーンに行ってきましたが、springの色とりどりのbacterial mudを見て、感慨深いものがありました。手をつけてみましたが、温かった覚えがあります。流石にボコボコ湧き出てるspringには手を突っ込む勇気はありませんでしたが・・
(無題)
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No.5536-6 - 2016/11/09 (水) 11:53:34 - おお
あ、タカラは温泉めぐりしていろいろな商品を出してたのか!
(無題)
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No.5536-5 - 2016/11/09 (水) 10:44:50 - 774R
知り合いに持ってる研究者がいれば、所属機関を通してMTAを交わしたのち、分譲してもらえば特に問題ないでしょう。その前に現所有者が分譲できる権限があるか要確認ですけど。
ちらっと見たら、Addgeneでも普通にラインナップされてましたよ。
https://www.addgene.org/25712/
2-3万円程度で購入可能だったったと思います。国内の輸入代理店もあるので手続きもそれほど面倒ではないです。(といっても、MTAや遺伝子組換え生物などの書類上の手続きは必要ですが・・・)
それとも、耐熱性ポリメラーゼのクローニングという題目で、研究費で各地の温泉めぐりもよいかもしれませんね(笑)
(無題)
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No.5536-4 - 2016/11/09 (水) 10:39:03 - おお
>これが何かの権利を侵害するような問題は
それは結構微妙な問題かもしれません。
ただいまはTaqってかなり安いんじゃないかな。もちろんいろいろな付加価値つけたりしていろいろなバリエーションのものが売ってたりしますけど。
(無題)
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No.5536-3 - 2016/11/09 (水) 10:11:12 -
Tak
ありがとうございます。
私はポスドクなのですが、自分がラボを構えるようになった時、こういうことができれば経済的ですよね。プラスミドをどこからか購入(か、若しくは自分でクローニング?)して、それを大腸菌で発現させればいいのですよね。
これが何かの権利を侵害するような問題は孕んでいないのでしょうか?
>[Re:2] おおさんは書きました :
> 実際にやってるラボ知ってるよ
(無題)
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No.5536-2 - 2016/11/09 (水) 09:19:13 - おお
実際にやってるラボ知ってるよ
Taq polymeraseの自家調製について
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No.5536-1 - 2016/11/09 (水) 09:01:21 -
Tak
お世話になります。
マウスのコロニーを沢山抱えるラボは、ゲノテイピング用のTaq polymeraseを自家調製しているとのことを耳にしました。Taq polymeraseのプラスミドをお持ちのようで、それを大腸菌か何かで発現させて、ラフに精製したものを使っているとのことでした。
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