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免疫染色の中断
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No.5468-TOPIC - 2016/10/13 (木) 10:48:02 - 名無し
凍結切片を用いて免疫染色をしています。
一次抗体を一晩反応させて、PBSで洗浄をし始めたのですが、どうしても実験を中断しなければならなくなりました。
PBSに切片をつけたまま数時間放置しても問題ないでしょうか?
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No.5468-3 - 2016/10/14 (金) 22:34:54 - 免染乙
washing後、一晩中PBSの中にいれて4Cにそのままにしたことあるけど、普通にやったときと比べて結果に特に違いは無かった。2、3時間くらいなら室温でも構わないと思うけど、1日とか長時間になりそうなら4Cに置いた方がいいかもしれない。とりあえず乾かさないように気をつければいい。
(無題)
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No.5468-2 - 2016/10/13 (木) 10:56:31 - AP
数時間なら問題ないと思います。
抗原抗体反応も結合反応と解離反応の化学平衡には違いなく、外液から抗体を抜いた溶液中では解離のほうに平衡がずれるので、長期間の放置は反応を弱める可能性があります。
免疫染色の中断
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No.5468-1 - 2016/10/13 (木) 10:48:02 - 名無し
凍結切片を用いて免疫染色をしています。
一次抗体を一晩反応させて、PBSで洗浄をし始めたのですが、どうしても実験を中断しなければならなくなりました。
PBSに切片をつけたまま数時間放置しても問題ないでしょうか?
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