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(無題) 削除/引用 No.5460-11 - 2016/10/12 (水) 20:48:31 - toto なるほど、それでウリジン酸が添加されているのですか。代謝を補うのかな。この現象はかなり以前から知られていたようで、Cell. Vol. 52, 811-819. March 25. 1988, に、EtBrを使ってヒト細胞のミトコンドリアを他のと置き換えるやり方が出てますが、EtBrでミトコンDNAを無くすのはもっと以前から知られていたようです。 不思議なのは、細胞のガン化を調べたときにはEtBrを加えてもガン化しなかった、ということは、死ななかった、ということですが、量の問題？それとも実はウリジン酸を加えていたりするのでしょうか。originalの論文にあたればいいのでしょうが、どれやら・・

(無題) 削除/引用 No.5460-10 - 2016/10/12 (水) 14:40:42 - おお >培養細胞でも同じことが起こるかがわかりませんけどね。 哺乳動物の細胞でも起こります。かなり増殖速度は落ちるんだとおもいますが。培地にウリジンとピルビン酸を加えると維持ができます。そういった細胞に細胞融合などで病気などで異常なミトコンドリアをいれて、増やすという実験もやられているようです。

(無題) 削除/引用 No.5460-9 - 2016/10/12 (水) 13:50:28 - SK 私は酵母でしかやったことはないですが、エチブロで処理をするとミトコンドリア欠損株を取得することができました。 培養細胞でも同じことが起こるかがわかりませんけどね。

(無題) 削除/引用 No.5460-8 - 2016/10/10 (月) 19:50:04 - toto 紹介された記事へのコメントの中にある rho-zero cells、知りませんでした。ミトコンドリア関係ではよく知られてるとのことでしたが、調べてみると、ミトコンドリアＤＮＡを30ng/mlのエチブロに細胞をつけとくだけで3-4日で選択的に除去すことができるのですね。興味深い現象ですが、あまり自分の中では起きて欲しくないものです。

(無題) 削除/引用 No.5460-7 - 2016/10/10 (月) 12:07:59 - 小言幸兵衛 最近、こんな記事がありました。 The Myth of Ethidium Bromide http://blogs.sciencemag.org/pipeline/archives/2016/04/18/the-myth-of-ethidium-bromide

(無題) 削除/引用 No.5460-6 - 2016/10/10 (月) 05:29:41 - おお ちなみにエチブロ自体には膜透過性はない（極めて透過しにくい）とされていますが、ミトコンドリアに行ったりはするんだよなぁ。

(無題) 削除/引用 No.5460-5 - 2016/10/10 (月) 05:02:41 - おお 定められている哺乳動物細胞を使った試験方法ではエチブロはネガティブですね。 http://www.meti.go.jp/meti_lib/report/2014fy/E003700.pdf p１９３ ミクロソームで活性化したフラクションでやる必要はないのかちょっとわかりませんけど。 あとエチブロは催奇性があるという試験結果があります。

(無題) 削除/引用 No.5460-4 - 2016/10/09 (日) 16:45:22 - AP >培養細胞の培地のなかにエチブロを入れて培養していたら、細胞はがん化するのでしょうか？？？ しません。 発がん物質というのは、「変異原性がある」からその可能性があるというだけで、これまで実例は見つかっていません。 変異原性に関してはAmes試験などで証明されています。ただし、EtBrそのものを与えても陰性で、マイクロソームで処理したときのみ（つまりp450などの代謝産物に）強い変異原性が見られます。 原報は当たっていませんが、ラットやマウスの動物実験でも発がん性の調査は行われいますが、陽性だったことは一度もないようです。

(無題) 削除/引用 No.5460-3 - 2016/10/09 (日) 15:44:16 - おお 肝臓のミクロソームと混ぜると変異原性の物質になりますので、やり方によってはなるかもね。エチブロはミトコンドリアのDNA複製も阻害されますので癌化の前に細胞がへたってくるかも。

(無題) 削除/引用 No.5460-2 - 2016/10/09 (日) 14:01:57 - ske Natureかなにかの記事で読みましたが、エチブロの発がん性が証明されたことはないそうです。だからといって素手で扱ってもいいわけではありませんが。

エチブロの発がん性 削除/引用 No.5460-1 - 2016/10/09 (日) 12:34:57 - akb ゲルの電気泳動のときに使われるエチブロは、「発がん物質」とされています。 培養細胞の培地のなかにエチブロを入れて培養していたら、細胞はがん化するのでしょうか？？？

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