BioTechnicalフォーラム [6-wellプレート等で、未使用ウェルの再利用]

6-wellプレート等で、未使用ウェルの再利用

No.5434-TOPIC - 2016/09/28 (水) 12:34:26 - 6w

6-wellや24-wellプレートで、一部のウェルのみを使い未使用のウェルが発生することがあると思うのですが、割と最近、未使用ウェルは無菌状態が保たれているはずなんだから、使用後はプレートを冷蔵庫にでも入れておいて再利用すればいいのでは、と思い再利用を始めました（使用済のウェルは、乾燥してカピカピ状態）。

これまでの所、プレートを繰り返し利用しても多分問題は出ていないように思うのですが、先日、Trizolで細胞を回収した後のプレートも何も考えずに再利用したところ、どうもインキュベーター内がフェノール臭くなってしまい、また6-wellプレートの内2つ離れたウェルでは平気そうだったのですが、Trizolで回収したウェルの隣のウェルの細胞は非常にダメージを食らっているように見えました。

かなり低レベルな質問かもしれませんが、Trizolを加えたプレートは、やはり捨てた方がよいというか再利用する上手い方法はないでしょうか…？それ以前に、もしそもそも一度培養に用いたマルチウェルプレートを再利用することはやめるべきだといった意見がありましたら、アドバイスいただけるとありがたいです。
　

- このトピックにメッセージを投稿する -

全7件 ( 1 ～ 7 )　前 | 次　1/ 1. /1

(無題)

削除/引用

No.5434-7 - 2016/09/28 (水) 23:52:08 - 6w

皆様、ご意見どうもありがとうございました。

なるほど、洗えばTrizolの影響は最小限に抑えられるけれども、相応のリスクも伴うという感じでしょうか。
24ウェルの内1-2ウェルしか使わなかった、なんて場合は洗った上で隣接ウェルは避ける感じでやり、6ウェルはリスクを考えると避けたほうが良さそう、と言える感じかもしれないですね。

大変参考になりました。瑣末な質問にお付き合いいただきましてお礼申し上げます。

(無題)

削除/引用

No.5434-6 - 2016/09/28 (水) 19:30:52 - alpha

Trizol（フェノール）は揮発性ですので、そのままインキュベータに戻すと周囲の細胞も死にます。
以前、私も同様のことをして、実験がダメになったことがあります。
隣のプレートに被害が出るほどではありませんでしたが、それもきっとそのときに使用したTrizolやウェルの数に依存するでしょうね。
PBSで洗えば大丈夫でしたが、ダメになることのほうが色々な面で出費がかさむと判断し、それ以降は再利用などしないようにしています。

(無題)

削除/引用

No.5434-5 - 2016/09/28 (水) 17:57:29 - 独り言

トライゾールはあまりやってませんが、DTT臭のするサンプルバッファーを入れたウェルはPBSで一回洗って、アスピレーターで完全に吸って、残りのウェルは普通に使いまわしてます。

使いかけのプレートは扉のある常温の棚に入れてます。冷蔵庫よりもある程度の通気があったほうがおいている間に乾燥しやすくていいと思います。ちゃんとフタしていれば雑菌が入ることはあまりないかと感じてます。

(無題)

削除/引用

No.5434-4 - 2016/09/28 (水) 15:42:23 - おお

No.5434-2 はいつもの私ではありません。Trizolでは流石に気持ち悪いので再利用していません。たいてい外に持ち出して外で蓋を開けるのでその時点でコンタミもしていますし。

(無題)

削除/引用

No.5434-3 - 2016/09/28 (水) 15:38:49 - おお

６Wellのプレートだと3.5cmDishとかと一緒だから、Wellの使ってない部分を使うぐらいなら3.5cmDishを使ったほうがいいんじゃないか。

ただ持ったりするのがちょっと不便なので、１０cmDishの蓋の上に載せたりして使っている人もいる（３個は乗ると思う）。

(無題)

削除/引用

No.5434-2 - 2016/09/28 (水) 12:43:56 - おお

Trizolを加えてRNA回収したwellは2度PBS等で洗ってから全てをアスピレートで除いています。その隣に細胞を巻いても問題ないです。ただ、 PBSで洗わないとやはり細胞のダメージは隣接するwellでは非常に大きいと思います。

というわけで再利用はしています。