Bio Technical フォーラム

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1.5mltubeの扱い方 トピック削除
No.5357-TOPIC - 2016/08/25 (木) 19:06:20 - 心配ポス毒
最近学生を指導していてふと自分のやり方に疑問がわいたので皆さんにご意見を伺いたいです.

私のラボでは,インスタントコーヒーの入っていたガラス瓶もしくはビーカーに1.5ml tube入れてオートクレーブをしています.オートクレーブの際アルミ箔で蓋をします.
今の研究室にきて驚いたのは,アルミ箔の蓋ががばがばのままだったり穴があいている状態でオートクレーブをかける人がいる事です.共通ではないのでスルーしていましたが・・・・.
オートクレーブの器機の中はけっして綺麗ではないと思うのですが,自分が神経質すぎるのでしょうか?


あと,オートクレーブした後の1.5mltubeって容器からどのようにしてとりだしますか?
綺麗かわからんピンセットで出していたり,手袋をした手を突っ込んで出している人も居て私的に引いているんですが・・・・.
よく見かけるのは,瓶やビーカーに蓋をしていたアルミ箔の蓋にtubeを出して使用するかんじですかね.最近これも,手袋が綺麗でないとコンタミの原因になるのでは?と考えるようになり疑心暗鬼ぎみです.

皆さんはどうしていますか?
自分の下についた学生には徹底的に仕込みたいと考えているのですが,お時間のある時にでもコメントいただければと思います.
 
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11件 ( 1 〜 11 )  前 | 次  1/ 1. /1


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No.5357-11 - 2016/08/27 (土) 17:30:00 - まっくろん
実験台に直接出すことなどがあまりにも気になる場合は、乾熱滅菌したアルミホイルとか、大きめのプラスチックシャーレに出すとかどうでしょう?

(無題) 削除/引用
No.5357-10 - 2016/08/27 (土) 14:06:07 - AP
それと、オートクレーブのときにアルミ箔をかけるのも私は基本的にやらない。
気休め、おまじないに過ぎないですよ。アルミ箔でなにからカードしようとしているつもりなのか? かえって容器とアルミ箔の隙間に汚水がはいった時なんかに、口のところまで広げてしまうんじゃないか? ただそれだけで消費されるアルミも相当な量になる。

(無題) 削除/引用
No.5357-9 - 2016/08/27 (土) 11:03:56 - AP
ベンチを清潔に保っていれば(実験中はそうあるべきですが)、直接、ベンチの上に振り出します。気にする人はアルミフォイルやサランラップなどを敷いた上に出しています(私は資源の無駄遣いで環境負荷をを上げると感じていますが)。少なくともチューブの内部は何に接触するわけでもないのでセーフだと思います。

(無題) 削除/引用
No.5357-8 - 2016/08/26 (金) 09:22:31 - 心配ポス毒
オートクレーブしない方が結構いらっしゃるんですね.
自分の認識を改めないとですね.
私自身,培養細胞と酵母の両方を扱っているのでもしもの事を考えてオートクレーブしていましたが几帳面になりすぎていたかもしれません.


ちなみに,袋からチューブを出す際はベンチにそのまま出しますか?

(無題) 削除/引用
No.5357-7 - 2016/08/26 (金) 07:51:59 - しろ
>[Re:6] outさんは書きました :
> オートクレーブをオートって略すヒト初めてみた…

すみません。。。単純に「クレーブ」とタイプするのが面倒だっただけで、普段はそのような略はしません。

(無題) 削除/引用
No.5357-6 - 2016/08/26 (金) 07:45:09 - out
オートクレーブをオートって略すヒト初めてみた…

ともあれ、わたしもプラスチックウェアのオートクレーブはしません。
培養フラスコやディッシュをわざわざ滅菌しないのといっしょ。

むかしはラボの流儀もあってしてましたけどね。

(無題) 削除/引用
No.5357-5 - 2016/08/26 (金) 04:21:29 - しろ
勉強になります。うちはLiveの細胞培養やウエスタン等プロテインなどではオートクレーブしたものを使って、RNA抽出では袋から取り出したものを使っています。正直なところ、ライブの細胞にはオートクレーブしたものを使いたいなー、という感覚でやっています。確かに袋からそのまま使えそうだよなとは思っていたのですが。まとめてオートクレーブしたものを、外であけた缶はプロテイン用として外で、クリーンベンチで空けたものはそのまま細胞培養用として使っています。クリーンベンチで使っていたものを外に持ち込むのはありにしていますが、外で使ったものを細胞培養系に使うのはナシとしています。外で使うプロテイン系もオートをしなくてもいいのでしょうが、ま、まとめてオートしちゃおうか、くらいでやっていました。。。RNAなんかは確かにそのまま使いますね。取り出すときは使うチューブ1個のふたの側面をつまんで他のチューブは触らないように取り出しています。ガバっとつかみ取りしてそのうちの1個を使っている人もいらっしゃいましたが、私もそういうのは少々気になりましたね。

(無題) 削除/引用
No.5357-4 - 2016/08/26 (金) 03:08:29 - おお
何が何でもオートクレーブしないとだめという上の人がいて困ったことがあります。はっきり言って汚れるので嫌です。それに理由を聞くとめちゃくちゃだったりします。

オートクレーブする理由としては、
無菌操作が必要(たとえばDNAを精製してトランスフェクションで使うとか)
分子生物学をやってた昔の人はおそらくDNaseなどのコンタミの可能性を排除するため(いまはNuclease freeと歌っている商品がでまわってますけど)
その他(オートクレーブを信じているなど)

まあ蓋のアルミのあなが開こうとも、無菌が必要ないならあまり関係ないでしょう。いずれにしろ蒸気が入ってきますので。

(無題) 削除/引用
No.5357-3 - 2016/08/25 (木) 21:45:01 - まっくろん
私も最近(と言ってももう5年以上)はオートクレーブしていません。理由はAPさんのご意見と同様です。現在は、バルクよりは少し高くなりますが、一定数包装(50本くらい?)で全て蓋が閉まった状態のものを使ってます。

(無題) 削除/引用
No.5357-2 - 2016/08/25 (木) 20:49:55 - AP
そもそもオートクレーブなんかしない。
分子生物学黎明期で市販のプラスチックウェアも100%信用できなかったころならならいざしらず、今じゃ普通のグレードでもヌクレアーゼフリー、パイロジェンフリー。開封後の管理さえきちんとしていれば汚染の心配はない。

オートクレーブかけると、釜のなかの汚れが、たとえ不揮発性の有機物質などであっても、エアロゾルとなって被滅菌物を汚染しうるし、熱をかけることでプラスチックウェアの可塑剤などがしみ出してきて反応を阻害する心配も出てくる。

わたしは、未開封の袋を自分専用として開封し、そこから直接、必要な本数を振り出して使っています。

1.5mltubeの扱い方 削除/引用
No.5357-1 - 2016/08/25 (木) 19:06:20 - 心配ポス毒
最近学生を指導していてふと自分のやり方に疑問がわいたので皆さんにご意見を伺いたいです.

私のラボでは,インスタントコーヒーの入っていたガラス瓶もしくはビーカーに1.5ml tube入れてオートクレーブをしています.オートクレーブの際アルミ箔で蓋をします.
今の研究室にきて驚いたのは,アルミ箔の蓋ががばがばのままだったり穴があいている状態でオートクレーブをかける人がいる事です.共通ではないのでスルーしていましたが・・・・.
オートクレーブの器機の中はけっして綺麗ではないと思うのですが,自分が神経質すぎるのでしょうか?


あと,オートクレーブした後の1.5mltubeって容器からどのようにしてとりだしますか?
綺麗かわからんピンセットで出していたり,手袋をした手を突っ込んで出している人も居て私的に引いているんですが・・・・.
よく見かけるのは,瓶やビーカーに蓋をしていたアルミ箔の蓋にtubeを出して使用するかんじですかね.最近これも,手袋が綺麗でないとコンタミの原因になるのでは?と考えるようになり疑心暗鬼ぎみです.

皆さんはどうしていますか?
自分の下についた学生には徹底的に仕込みたいと考えているのですが,お時間のある時にでもコメントいただければと思います.

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