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CELLBANKER1で細胞凍結 トピック削除
No.5351-TOPIC - 2016/08/24 (水) 13:58:24 - たていす
今まで、10%DMSO入りのDMEM-10FBS+細胞凍結用のボックス(BICELL)で凍結していたのですが、今回、CELLBANKER1(NIPPON ZENYAKU KOGYO)で293細胞を凍結します。
CELLBANKER1の取説を読むと、特別な細胞凍結ボックスを使うような指示はありません。CELLBANKER1を使ってみた感触としては、BICELLでも、紙箱に直入れでも、-80度凍結でさして違いが無いような気がします。
そこで、凍結条件について質問です。

1)CELLBANKER1で凍結するときは、急速凍結のほうが良いのか?
2)それとも、やはりBICELLや発泡スチロールボックスで凍結するほうが良いのか?

同じもしくは異なる細胞でのご経験や情報をお持ちの皆様、お教えください。
 
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CELLBANKER1で細胞凍結 解決済み 削除/引用
No.5351-5 - 2016/08/24 (水) 21:13:03 - たていす
皆様、ご回答ありがとうございます。
基本的に直接凍結で(が)良いということのようですね。
面倒がひとつ減るので、今後は直接凍結します。

(無題) 削除/引用
No.5351-4 - 2016/08/24 (水) 17:52:01 - TS
1plusで複数の細胞を使ってます。

マニュアルは-80℃フリーザーに入れることになってますよね。
Bicellとかは書かれてなかったと思う。

経験上、紙箱でもBicellでもどちらでもOK。

液体窒素で凍結とかはだめ。

(無題) 削除/引用
No.5351-3 - 2016/08/24 (水) 17:16:50 - mon
私の環境では、293細胞やがん細胞株程度なら、CELLBANKER1(1plus、2共)中で-80℃フリーザー(紙箱やエッペンラック)に直接いれても問題ないです。
液量(細胞数)が多いときは15mLチューブや50mLチューブでもOK。
ただし、解凍は30-37℃で素早く溶かします。。
最近はより安価なものを使っていますけど。
気になるなら、少量で試しましょう。

(無題) 削除/引用
No.5351-2 - 2016/08/24 (水) 15:25:15 - おお
メーカーに問い合わせるのが一番かと思います。

想像で回答すると(想像なので外れているかもしれませんよ)、まず急速といってもいきなり液体窒素はだめじゃないかなと思います。まあやってみるとわかるでしょう。

細胞内の氷の形成が悪さをしないように水分を細胞から奪いながら凍結していくんだと思いますので、凍るタイミングが重要なんでしょう。セルバンカーに何が入っているかよくわかりませんが、通常のDMSOなどを使ったプロトコールよりラフでいいような印象が彼らのプロトコールから見て取れますので、おそらく入っている成分が温度コントロールをうまくできるように配合されているか、細胞内の水分調整が通常の方法より早いのかなという感じがします。あくまでも想像です。

CELLBANKER1で細胞凍結 削除/引用
No.5351-1 - 2016/08/24 (水) 13:58:24 - たていす
今まで、10%DMSO入りのDMEM-10FBS+細胞凍結用のボックス(BICELL)で凍結していたのですが、今回、CELLBANKER1(NIPPON ZENYAKU KOGYO)で293細胞を凍結します。
CELLBANKER1の取説を読むと、特別な細胞凍結ボックスを使うような指示はありません。CELLBANKER1を使ってみた感触としては、BICELLでも、紙箱に直入れでも、-80度凍結でさして違いが無いような気がします。
そこで、凍結条件について質問です。

1)CELLBANKER1で凍結するときは、急速凍結のほうが良いのか?
2)それとも、やはりBICELLや発泡スチロールボックスで凍結するほうが良いのか?

同じもしくは異なる細胞でのご経験や情報をお持ちの皆様、お教えください。

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