全8件 ( 1 〜 8 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

(無題) 削除/引用 No.5318-9 - 2016/08/08 (月) 21:02:18 - toto 私もMonoFasカラムに一票。シリカなど顆粒からなる他の樹脂と違ってMonoFasは一体になったカラムだからでしょうが、Bacサイズでも高い収率で取れます。簡単だし。サンプルをもらえるはず。

(無題) 削除/引用 No.5318-8 - 2016/08/08 (月) 17:59:07 - mon MonoFasカラムはBACも取れるようです。 http://www.gls.co.jp/lifescience/monofas/dna_abstraction1/index.html

(無題) 削除/引用 No.5318-7 - 2016/08/08 (月) 15:08:02 - 中年 アガラーゼも簡単で使いやすい。

(無題) 削除/引用 No.5318-6 - 2016/08/08 (月) 15:02:30 - おお 透析膜にいれて電気泳動やったことがありますよ。Electroelutionといってました。

(無題) 削除/引用 No.5318-5 - 2016/08/08 (月) 15:02:12 - AP シリカなどにくっつけるタイプのは、高分子量DNAに対しては結合や溶出の効率が高くないためか収量が低かったり、剪断力がかかって断片化がおこる。 マトリックス結合によらない方法を勧める。

(無題) 削除/引用 No.5318-4 - 2016/08/08 (月) 14:57:58 - AP ・フェノール抽出：低融点アガロースで泳動、切り出し、適当量のバッファーを加え、65℃程度の温和な加温で融解、フェノール(クロロフォルム不含）で抽出、EtOH ppt ・電気溶出：切り出したゲル片を泳動バッファー入りの透析膜にパック、泳動槽に戻して通電してゲルから溶出、透析膜内のバッファーを回収、必要に応じてPCI抽出、EtOH ppt フェノール抽出の時にはvortexはしないで穏和に攪拌。

(無題) 削除/引用 No.5318-3 - 2016/08/08 (月) 14:56:58 - ema 「30Kb plasmid　精製」で検索するとロシュ、チヨダ、北海道システムサイエンスなど色々な会社のものが見つかります。＜10Kbとキットに書いてあるのになぜQiagen等を試したのでしょう？ 昔、アガロースを切り出し、透析膜に入れて（きれいな泳動バッファーを少し入れて）電気泳動します。透析膜内のバッファーに目的バンドのものが出てきますので、フェノクロ、エタ沈で回収ということをしていました。

20-30 kbpのプラスミド 削除/引用 No.5318-1 - 2016/08/08 (月) 14:47:45 - ヤンマー アガロースで泳動後に20-30 kbpのプラスミドの切り出し・精製をしたいと考えています。 QIAGENやPromegaのキットでは多くのものが＜10 kbp対応となっており、試してみましたが精製できませんでした。 同じくらいの大きさのプラスミド精製について、経験のある方々はどうされていますか？方法やどのキットが良いなどアドバイスを頂けますか？

全8件 ( 1 〜 8 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

パスワードを入力してチェックした記事を

チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する 名前  メール  　アドレス非公開    タイトル  本文       設定  クッキーを保存（次回の入力の手間を省けます） 上に上げない（トピックの一覧で一番上に移動させません） 解決（問題が解決した際にチェックしてください） 暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。 送信

---

〔使い方〕 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。

---