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組織中からのmRNAの抽出
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No.5284-TOPIC - 2016/07/28 (木) 17:41:12 - yuki-
リアルタイムPCRを脳、肝臓で行いたいのですが組織を取る際、DEPC水などで灌流して血液を除去した方が良いのでしょうか?様々なハンドブックには素早く組織を取ると明記してありますが、その際の作業工程が書いてありません。素早く取るためには灌流はしない方がいいようにも思いますが、血液が残留する影響が不安です。
どなたか、アドハイスをいただけるようでしたらお願いします。
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No.5284-3 - 2016/07/29 (金) 00:06:00 - おお
血液などを除くために灌流する人もいるのではないかと思います。肝臓は特に多いのではと。。。灌流は水でやりますかね普通、、、PBSとかじゃ。。。
(無題)
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No.5284-2 - 2016/07/28 (木) 18:00:32 - OK
する人もいるかもしれませんが、perfusionはやり方によっては組織に何かしら影響すると思いますよ。まずはperfusion無しでやってみて、それできちんと目的のmessagesが見れるか確認するのがいいかもしれません。
その後、組織染色やISHなどでそのmessagesやproteinsが血液細胞に染まらず実質等に染まっていることを確認すればいいように思います。
組織中からのmRNAの抽出
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No.5284-1 - 2016/07/28 (木) 17:41:12 - yuki-
リアルタイムPCRを脳、肝臓で行いたいのですが組織を取る際、DEPC水などで灌流して血液を除去した方が良いのでしょうか?様々なハンドブックには素早く組織を取ると明記してありますが、その際の作業工程が書いてありません。素早く取るためには灌流はしない方がいいようにも思いますが、血液が残留する影響が不安です。
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