Bio Technical フォーラム

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チオグリコレートの作成 トピック削除
No.5267-TOPIC - 2016/07/22 (金) 19:06:32 - 院生
マウスの腹腔内投与のためにチオグリコレートを使用しています。
茶色のネジ口試験管(15ml)に分注してからオートクレーブをかけているのですが、
オートクレーブ後、温度が下がった頃には底に5mm程度の凝固した層が生じてしまいます。凝固させないためのコツなどありましたらご教示ください。

以下手技を記載します。

・ビーカーにて粉末のチオグリコレートに滅菌水を加え、4%チオグリコレートを作成
・マグネチックスターラーで十分に攪拌する
・15mlの茶色ネジ口試験管に分注する
・蓋を少し緩めた状態でオートクレーブにかける
・終了後は室温(28℃)に置く

上記後2時間程度で前述の凝固が生じます。
またオートクレーブ後に蓋を占めてから冷やした場合、直ちに4℃に保存した場合も同様の結果でした。

よろしくお願いします。
 
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ゆるい感じ 削除/引用
No.5267-2 - 2016/07/25 (月) 16:24:26 - ema
チオグリコレート培地と呼ばれるものの中には組成に「カンテン」と表記されているので、ある程度入っているものは固まるのでは?
昔で自分が使ってたのがDifcoどのカタログNoだったか忘れましたが、
蓋を少し緩めた状態でオートクレーブにかける→混ぜて再度オートクレーブ→終了後は蓋を緩めたまま暗い所で室温に置く→2週間くらいすると下が黄色から緑(酸化)がかる と習い使用していました。
酸化させた方が誘導が良い、下の方が色が変わるということは何らかの比重が異なるのかなとも思います。

チオグリコレートの作成 削除/引用
No.5267-1 - 2016/07/22 (金) 19:06:32 - 院生
マウスの腹腔内投与のためにチオグリコレートを使用しています。
茶色のネジ口試験管(15ml)に分注してからオートクレーブをかけているのですが、
オートクレーブ後、温度が下がった頃には底に5mm程度の凝固した層が生じてしまいます。凝固させないためのコツなどありましたらご教示ください。

以下手技を記載します。

・ビーカーにて粉末のチオグリコレートに滅菌水を加え、4%チオグリコレートを作成
・マグネチックスターラーで十分に攪拌する
・15mlの茶色ネジ口試験管に分注する
・蓋を少し緩めた状態でオートクレーブにかける
・終了後は室温(28℃)に置く

上記後2時間程度で前述の凝固が生じます。
またオートクレーブ後に蓋を占めてから冷やした場合、直ちに4℃に保存した場合も同様の結果でした。

よろしくお願いします。

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