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BSA/FBS以外のブロッキングバッファー
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No.5241-TOPIC - 2016/07/14 (木) 00:32:32 - ぼにょ
いつもお世話になっております。
この度フローサイトメトリーや免疫染色で用いるブロッキング剤に関して質問がございます。(詳細は書けないのですが、これらを用いた新規実験系の開発を行っております。)
PBS+BSAやPBS+FBS以外に抗体のNon-specificな結合を弱める試薬をご存じないでしょうか?
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BSA/FBS以外のブロッキングバッファー
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No.5241-6 - 2016/07/15 (金) 11:08:58 - ぼにょ
うぉ!
こんなに色々とあるのですね。
Ks様有難うございます!
実はTritonやTween無しで染色した際にバックグラウンドが上昇してしまうのが悩みでした。Permeabilize以外にもバックグラウンドを下げる効果もあるんですね。
試してみます。有難うございます!
(無題)
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No.5241-5 - 2016/07/14 (木) 21:07:23 - Ks
TritonやTween等の界面活性剤は
抗体の非特異的な疎水的結合を抑制してくれます。
スキムミルクやBSA等の汎用試薬より性能の高い
ブロッキング専用試薬を各社発売しています。
大別して精製タンパク質系と合成高分子系に分かれるようです。
前者はThermo FisherのStartingblockやSeablock等、
後者は日油のN101等でしょうか。
ナカライのBlocking Oneのようにタンパクと高分子両方を含む試薬もあります。
BSA/FBS以外のブロッキングバッファー
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No.5241-4 - 2016/07/14 (木) 10:50:08 - ぼにょ
あ様、うんちょこちょこちょこぴー様、有難うございます。
できれば血清以外が良かったので
うんちょこちょこちょこぴー様のゼラチンは非常に有益な情報です。
うんちょこちょこちょこぴー様重ねて有難うございます。
他にも何かあれば試してみたいと思っております。
(無題)
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No.5241-3 - 2016/07/14 (木) 04:37:17 - あ
もし第2抗体を使うなら、その動物種と同じ血清
(無題)
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No.5241-2 - 2016/07/14 (木) 02:59:59 - うんちょこちょこちょこぴー
HSAとかFcRブロッカーとか。2.8%馬血清は良かったです。ゼラチンとかも使えるかな?
BSA/FBS以外のブロッキングバッファー
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No.5241-1 - 2016/07/14 (木) 00:32:32 - ぼにょ
いつもお世話になっております。
この度フローサイトメトリーや免疫染色で用いるブロッキング剤に関して質問がございます。(詳細は書けないのですが、これらを用いた新規実験系の開発を行っております。)
PBS+BSAやPBS+FBS以外に抗体のNon-specificな結合を弱める試薬をご存じないでしょうか?
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