不死化したマウス線維芽細胞MEFsを使用し、リガンド(TNFやLPS)で刺激し、qPCRで炎症性サイトカイン等の発現変化を調べています。
困ったことに、以前応答のあった(炎症性サイトカイン等の発現増加のあった)MEFsの応答を認めることができなくなりました。
リガンド(TNFやLPS)に応答する細胞(RAW細胞など)では、変わらず、細胞応答を確認することができますので、qPCRは問題ないかと思います。
不死化したMEFsにおいて細胞応答が変わることがあるのでしょうか。
不死化したMEFsは感受性が高い細胞だと思っており、最近使用し始めたため、
何か注意事項等ありましたら、教えてくだされば幸いです。
よろしくお願い致します。 |
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