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不死化したマウス線維芽細胞MEFsの応答性 トピック削除
No.522-TOPIC - 2012/05/15 (火) 18:50:05 - 細胞応答
不死化したマウス線維芽細胞MEFsを使用し、リガンド(TNFやLPS)で刺激し、qPCRで炎症性サイトカイン等の発現変化を調べています。

困ったことに、以前応答のあった(炎症性サイトカイン等の発現増加のあった)MEFsの応答を認めることができなくなりました。

リガンド(TNFやLPS)に応答する細胞(RAW細胞など)では、変わらず、細胞応答を確認することができますので、qPCRは問題ないかと思います。

不死化したMEFsにおいて細胞応答が変わることがあるのでしょうか。

不死化したMEFsは感受性が高い細胞だと思っており、最近使用し始めたため、
何か注意事項等ありましたら、教えてくだされば幸いです。

よろしくお願い致します。
 
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(無題) 削除/引用
No.522-2 - 2012/05/16 (水) 09:24:31 - ~
継代を続けると細胞の刺激に対する応答性が変わる、というのは珍しくありませんね。

継代数や培養条件(FBSのロット等)を確認されてはいかがでしょうか。

不死化したマウス線維芽細胞MEFsの応答性 削除/引用
No.522-1 - 2012/05/15 (火) 18:50:05 - 細胞応答
不死化したマウス線維芽細胞MEFsを使用し、リガンド(TNFやLPS)で刺激し、qPCRで炎症性サイトカイン等の発現変化を調べています。

困ったことに、以前応答のあった(炎症性サイトカイン等の発現増加のあった)MEFsの応答を認めることができなくなりました。

リガンド(TNFやLPS)に応答する細胞(RAW細胞など)では、変わらず、細胞応答を確認することができますので、qPCRは問題ないかと思います。

不死化したMEFsにおいて細胞応答が変わることがあるのでしょうか。

不死化したMEFsは感受性が高い細胞だと思っており、最近使用し始めたため、
何か注意事項等ありましたら、教えてくだされば幸いです。

よろしくお願い致します。

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