こんにちは。初めての投稿です。よろしくお願い致します。
母体へのEdUの腹腔注射の30分後に胎生マウスの脳を取りだし、PFAによる後固定ののち、スクロース置換して包埋したものを凍結し、クリオスタットにより切片を作成、キットにより抗体反応を起こしEdU染色を行っているのですが、染色の工程ではなく、脳のプリパレーションの段階の問題で染色が上手くいきません。
間違いなく染まると分かっている切片で染色の工程をやってみると、必ず染まりますし、同時期に他の方が切片作成までしてくださった物はきれいに染まるので、染色の工程も、EdUの質も大丈夫な様です。また、EdUの打ち損じが無いことも間違いありません。また、BrdU等、他の免疫染色は正常にできています。
何が原因か分からない状態なので、直接解決策を提示して頂くのを期待している訳ではなく、何か、直接関係あるかは不明でも、ヒントになるような事がございましたら、お教え頂けるとありがたいです。 |
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