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ありがとうございます 削除/引用 No.5071-3 - 2016/05/19 (木) 11:31:59 - ともな おお様 早々にありがとうございます。 誘導できるかどうかを見ようと思って始めた実験です。 筋組織の初代培養や脳腫瘍幹細胞のスフェア形成に用いられている組成で、まず試してみました。 細胞塊はできたものの、あまりの速さに、おおさんのおっしゃるようにサイズ(成長具合)のような外見で、判断するのは難しいと感じています。 マーカーまでは考えていなかったので、再度、論文を確認してみます。 C2C12をフローサイトメトリーでより未分化なものを選択するようなことをしていれば、結果は変わったかもしれないです。 C2C12自体、未分化状態ではないとも言われることもありますので、その辺りも含めて考えてみます。

(無題) 削除/引用 No.5071-2 - 2016/05/18 (水) 14:17:37 - おお 詳しくないのでいい加減なことを言ってるかもしれませんが、C2C12から誘導できるんですかね？ 論文を５個ぐらい当たったけど、なんか統一性がないですね。MyoDの発現がない（低い）とか、マウスだとSca-1が上がるだとかありますけど。β3 integrin.がポジって書いたの見たけど、それ以外しか調べてない文献もあったりして。その辺をよく調べてベストと思われるマーカーで判断されるといいかもしれません。 外見からは結構厳しいかもしれませんよ。

C2C12の細胞間接着 削除/引用 No.5071-1 - 2016/05/18 (水) 13:12:48 - ともな 初代培養をやる前に、まずはC2C12でと思い、自己複製の評価のため、Myosphere形成の実験を行っています。 論文の数は少ないですが、それらを参考に、下記の栄養因子を用いています。 ｂFGF 20ng/ml EGF 20ng/ml B27 培地はDMEM/F12で、低接着性のプレートに、一定数の細胞を播種し、24時間後、100umを超えるサイズのスフェアもあり、これはただ、細胞同士が接着した(集合した)だけではないかと不安に思ってしまいました。 実際、上記の因子を使わず、通常の増殖培地である10％FBS DMEMにメチルセルロースを1.5%添加したものでも細胞塊を形成します。 こちらも一晩でかなり大きいものが出来上がっていました。 C2C12の細胞間接着(こう呼んでいいのか分かりませんが)につきまして、こんな特徴がある、というのをご存じの方がいらっしゃいましたら、教えて頂けませんでしょうか。

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