おはようございます!!
PCRしてバンドを確認したいんですが、出て欲しい検体にバンドが出ません…
ECMで飛ばして得た組織由来のmRNAなんで極微量です。65サイクルは相当なもんだと思いますが。
HPRTは出てるのでちゃんと逆転者反応は起きてるはずなんですが。。。。。。コンタミの可能性はありますが。。。。。
定量PCR用のサイバーグリーン(バイオラッド)でPCRしてますが、やっぱり普通のPCR?(タックポリメーゼとか使ったりして)でやった方がいいですかね?
100サイクルでもバンドさえ出てくれればそれでこの実験は終わりになるのですが、サイバーグリーンの試薬では100サイクル持ちませんかね?何か工夫がありましたら教えてください!! |
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