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(無題) 削除/引用 No.5050-4 - 2016/05/10 (火) 07:03:34 - おお それから泳動バッファーに加えて再酸化を防ぐっていうのがあったと思いますが、何だったかおもいだせません。

(無題) 削除/引用 No.5050-3 - 2016/05/10 (火) 01:31:27 - おお >原理的にはSDS-PAGEのゲル作成時に還元剤を入れて電気泳動をすれば、同じような結果が得られるように思うのですが、そのようにして実験をやったことがある方はいらっしゃいますでしょうか？ APさんがおっしゃるような懸念があるのでやったことはありません。たまにスタッキングゲルに加えたいことがあって、アガロースを使うことはあります。あとサンプルバッファーの場合はボイルするというのもありますので。ボイルしなくともかなり還元されているでしょうけど、物によっては外れにくいのもあるという噂はききます。

(無題) 削除/引用 No.5050-2 - 2016/05/09 (月) 19:33:27 - AP 還元剤を混ぜると、アクリルアミドがラジカル連鎖反応で重合することによって起こるゲル化に少なからず影響がありそうですが。最悪、ラジカルスカベンジャーとして働いて、ゲルが固まらない、そうでなくても分子篩の性能に影響がありそう。

SDS-PAGEにおいて還元剤をゲル組成に加える 削除/引用 No.5050-1 - 2016/05/09 (月) 18:40:14 - kawa 還元状態のタンパク質を電気泳動するには、サンプルバッファー中にDTTやメルカプトエタノールを加えて煮沸するのが一般的と思います。 一方、原理的にはSDS-PAGEのゲル作成時に還元剤を入れて電気泳動をすれば、同じような結果が得られるように思うのですが、そのようにして実験をやったことがある方はいらっしゃいますでしょうか？ 二次元電気泳動では、一次元で泳動したゲルを還元剤を入れたバッファーで浸漬してタンパク質を還元状態にするプロトコルがあるので、ゲル中のタンパク質には還元剤が供給されるものと考えています。 （電気泳動中に十分量供給されるかが問題ですが…）

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