Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「新しいトピックを作る」から書き込みをしてください。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

新しいトピックを作る | トピック一覧 | 研究留学ネットに戻る

ひとつ前のフォーラム(readのみ)

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

血清のSDS-PAGEのアルブミンに関して。 トピック削除
No.5043-TOPIC - 2016/05/06 (金) 21:46:54 - YK
人正常血清のSDS_PAGEにトライしていますが、目的のタンパク質が65kDaとアルブミンに近いこと、そのたんぱく質の血清中に含まれる量は少ないことにより泳動及び検出に難渋しています。

解決策は、アルブミンを除去する操作をまず行うこと、もしくはその特定のタンパク質を免疫沈降で濃縮することを考えていますが、そのタンパク質に対する抗体は25ugで数万円と、現実的ではなく、免疫沈降ぬ使えるかどうかも定かではありません。

アルブミンを除去する方法があればいいのですが、効率が良い方法でオススメをご紹介いただけないでしょうか?血清そのものは豊富にあります。

どうかご教示いただけますと幸いです。
 
- このトピックにメッセージを投稿する -



5件 ( 1 〜 5 )  前 | 次  1/ 1. /1


(無題) 削除/引用
No.5043-5 - 2016/05/07 (土) 06:51:13 - ano
なぜSDS−PAGE(と、たぶんウエスタンブロットも)しているのか
不明ですが、定量ならEIAとかRIAを実施したらよいのでは?

PAGE乙 削除/引用
No.5043-4 - 2016/05/07 (土) 02:25:39 - 1qw2え3お90p−
アルブミンはシバクロンブルーとかブルーセファロースとか青色系の担体にくっつくので、それで簡易型の手製のカラムを作って血清を通すとか、市販の除アルブミンキット買うとかいろいろ。ただ大事な事は抗アルブミン特異抗体でも使わない限り、多くの方法はアルブミン以外のものもそれなりに除かれるので必要なものまでアルブミンと一緒に無くなったら困るので気をつけたほうがいい。
SDS-PAGEしてゲル染めてみるということならば、めざすものがそれなりにたくさんの量ないと、たとえアルブミン除いても見える保障はないとおもう。また銀染色などで検出を高感度化したらしたで、沢山のマイナーな蛋白質やアルブミンの残りのバンドが見えてきてしまいそれはまたそれで難しくなる。

(無題) 削除/引用
No.5043-3 - 2016/05/06 (金) 22:45:23 - AP
硫安沈殿

(無題) 削除/引用
No.5043-2 - 2016/05/06 (金) 21:56:36 - 中年
「アルブミン除去」でGoogle検索してみましたか?

血清のSDS-PAGEのアルブミンに関して。 削除/引用
No.5043-1 - 2016/05/06 (金) 21:46:54 - YK
人正常血清のSDS_PAGEにトライしていますが、目的のタンパク質が65kDaとアルブミンに近いこと、そのたんぱく質の血清中に含まれる量は少ないことにより泳動及び検出に難渋しています。

解決策は、アルブミンを除去する操作をまず行うこと、もしくはその特定のタンパク質を免疫沈降で濃縮することを考えていますが、そのタンパク質に対する抗体は25ugで数万円と、現実的ではなく、免疫沈降ぬ使えるかどうかも定かではありません。

アルブミンを除去する方法があればいいのですが、効率が良い方法でオススメをご紹介いただけないでしょうか?血清そのものは豊富にあります。

どうかご教示いただけますと幸いです。

5件 ( 1 〜 5 )  前 | 次  1/ 1. /1


パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する
名前 
メール   アドレス非公開
   タイトル 
本文      
設定  クッキーを保存(次回の入力の手間を省けます)
上に上げない(トピックの一覧で一番上に移動させません)
解決(問題が解決した際にチェックしてください)
暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信 

〔使い方〕
  • 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
  • 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
  • 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。