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HEPG2細胞をハイグルコース培地で飼ってしまった トピック削除
No.5018-TOPIC - 2016/04/26 (火) 11:18:57 - 初学者
ATCCというところからHepG2という細胞を買ったんですが、添付文書を読むこと無く他の癌細胞同様に4.5グラム/リットルのグルコースが入った培地(補助員さんがそれを作ってくれてるんです)で培養しました。

が、ATCCには1グラム/リットルのものを使用するようにと書かれてあることに気付きました。
というのも僕も目的がこの細胞でインスリン刺激をする実験をするからです。論文によると4.5グラム/リットルの培地をハイグルコースとしており、この培地で飼うとインスリンに不応答ニ鳴るようです…付いてる先生には正直に伝えましたが、馴化していけばいいと言われました。

計算すると1グラム/リットルのグルコースは健常人の末梢血グルコースを同等でした。

今ある細胞を1グラム/リットル グルコース培地に置換すると細胞が全滅しました。
やはり馴化は必要そうです。方法が分からないのでご経験あります方がいらっしゃれば教えてください。本当に情けないです…
 
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(無題) 削除/引用
No.5018-3 - 2016/04/28 (木) 18:12:19 - ATCG
HepG2細胞は、広く普及しているごくありふれた株細胞の一つですので、国内の公的な細胞バンクからすぐに安価で購入出来ると思いますから、買い直した方がbetterとおもいます。もし海外で仕事されているということでないならば、わざわざATCCから購入しなくてはならない特別な事情があるのでしょうか。

(無題) 削除/引用
No.5018-2 - 2016/04/26 (火) 12:38:55 - おお
グルコースのほかの要因も疑ったほうがいいような気がしますが、、、グルタミンが入ってなかったとか、、、急に全滅しましたか?1g/LのレシピはEMEMなどでも使われているオリジナルの量で、この量は血中のグルコース濃度を参考にしているのだと思います。

HEPG2細胞をハイグルコース培地で飼ってしまった 削除/引用
No.5018-1 - 2016/04/26 (火) 11:18:57 - 初学者
ATCCというところからHepG2という細胞を買ったんですが、添付文書を読むこと無く他の癌細胞同様に4.5グラム/リットルのグルコースが入った培地(補助員さんがそれを作ってくれてるんです)で培養しました。

が、ATCCには1グラム/リットルのものを使用するようにと書かれてあることに気付きました。
というのも僕も目的がこの細胞でインスリン刺激をする実験をするからです。論文によると4.5グラム/リットルの培地をハイグルコースとしており、この培地で飼うとインスリンに不応答ニ鳴るようです…付いてる先生には正直に伝えましたが、馴化していけばいいと言われました。

計算すると1グラム/リットルのグルコースは健常人の末梢血グルコースを同等でした。

今ある細胞を1グラム/リットル グルコース培地に置換すると細胞が全滅しました。
やはり馴化は必要そうです。方法が分からないのでご経験あります方がいらっしゃれば教えてください。本当に情けないです…

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